Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Чувствительный и свободный от помех метод тандемной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии для измерения метанефринов в плазме

Джессика Габлер, Чао Юань, Витольд Воронецки, Хуафэнь Лю и Сихэ Ван

Предыстория: Плазменные метанефрины являются основными биомаркерами, используемыми для диагностики феохромоцитомы. Однако низкие физиологические уровни метанефринов, физико-химические свойства и потенциальные помехи затрудняют достижение высокой чувствительности и специфичности. В этом отчете мы разработали и проверили чувствительный и свободный от помех метод жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) для измерения плазменных метанефринов с простой подготовкой образца.

Методы : Образцы плазмы извлекались с использованием картриджей для твердофазной экстракции со слабым катионообменником и анализировались методом ЖХ-МС/МС с временем аналитического цикла менее шести минут.

Результаты: Абсолютное подавление ионов и матричный эффект были обнаружены, однако были полностью компенсированы внутренними стандартами. Адреналин, изобарический интерферент норметанефрина, был хроматографически разделен, и не было обнаружено никаких интерференций от других распространенных интерферентов. Метод был линейным от 0,08 до 22,2 нмоль/л для норметанефрина и от 0,03 до 8,2 нмоль/л для метанефрина с точностью в диапазоне от 81 до 107%. Не наблюдалось никакого переноса до 56,8 нмоль/л для норметанефрина и 8,7 нмоль/л для метанефрина. Внутрипробные и общие CV были в пределах 6,8% для норметанефрина и 5,2% для метанефрина для трех протестированных уровней. На основе регрессии Деминга сравнение с референтным методом ЖХ-МС/МС с использованием образцов пациентов (n=40) показало
наклон 0,973, отсекаемый элемент 0,11 нмоль/л и коэффициент корреляции 0,9936 для норметанефрина и наклон 1,039, отсекаемый элемент -0,014 нмоль/л и коэффициент корреляции 0,9914 для метанефрина. Среднее различие составило 3,5% и -1,6% для норметанефрина и метанефрина соответственно.

Заключение: Этот анализ ЖХ-МС/МС чувствителен и не создает помех для количественного определения метанефринов в плазме.