Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Определение ротлерина, природного ингибитора протеинкиназы С, в клетках рака поджелудочной железы и ксенотрансплантатах мышей методом ОФ-ВЭЖХ

Цин-И Лу, Лифенг Чжан, Аурелия Лугеа, Ауне Моро, Муад Эддеркауи, Гвидо Эйбл, Стивен Дж. Пандол и Вай-Лян В. Го

Ротлерин — это природный полифенольный кетон, выделенный из перикарпия Mallotus phillippinensis. В предыдущих исследованиях мы показали, что парентеральное введение ротлерина снижает рост опухоли в мышиных моделях ксенотрансплантата рака поджелудочной железы. Целью данного исследования была разработка простого и проверенного метода количественного определения ротлерина в плазме и опухолевых тканях мышей, получавших диету с ротлерином. Ксенотрансплантатная модель рака поджелудочной железы была подготовлена ​​путем инъекции 2×106 клеток HPAF-II подкожно голым мышам. За неделю до имплантации опухоли мышей случайным образом распределяли на стандартную диету (AIN76A) и стандартную диетическую добавку с 0,012% ротлерина (n=6 на группу). Мышей умерщвляли после 6 недель диеты. Ротлерин извлекали из плазмы и тканей с помощью метода преципитации-экстракции белка и анализировали методом обращенно-фазовой ВЭЖХ-DAD. Тот же метод ВЭЖХ также применялся для определения уровней ротлерина в кондиционированных питательных средах и в клеточных лизатах клеток HPAF-II, подвергнутых воздействию 25 мкМ концентрации ротлерина. Значительное количество ротлерина было обнаружено в опухоли (2,11 ± 0,25 нмоль/г ткани) и плазме (2,88 ± 0,41 мкМ) у мышей, получавших диету с ротлерином. Кроме того, значительные уровни ротлерина (57,4 ± 5,4 нмоль/мг белка) были обнаружены в клеточных лизатах клеток HPAF-II, обработанных ротлерином. Эти данные указывают на то, что ротлерин эффективно абсорбируется в клетках и тканях как in vivo, так и in vitro, и предполагают сильный потенциал ротлерина в качестве профилактической или вспомогательной добавки при раке поджелудочной железы.