ISSN: 2167-0412
Waraporn Putalun, Hiroyuki Tanaka, Seiichi Sakamoto and Yukihiro Shoyama
Рекомбинантное одноцепочечное фрагментное вариабельное антитело (scFv) было сконструировано из линий клеток гибридомы, экспрессирующих моноклональное антитело (МАб) против соламаргина (As). Характеристики белка As-scFv, экспрессированного как в рекомбинантной Escherichia coli, так и в волосатом корне, были почти такими же, как и у исходного MAb. До 220 нг рекомбинантного As-scFv было получено на миллиграмм растворимого белка в культурах трансгенных волосатых корней S. khasianum. Концентрация гликозидов соласодина была в 2,3 раза выше в трансгенных, чем в волосатых корнях дикого типа, что отражает уровень растворимого As-scFv. Рекомбинантное растение S. khasianum, регенерированное из рекомбинантных волосатых корней, содержало в 2,3 раза больше гликозида соласодина по сравнению с регенерированным растением из волосатых корней дикого типа. Эти результаты свидетельствуют о том, что антитело scFv, экспрессированное в трансгенном растении, контролировало уровень антигена. Эта методология является первым успешным достижением в молекулярной селекции вторичных метаболитов без понимания биосинтетических ферментов.