Журнал прикладной фармации
Открытый доступ

Абстрактный

Четырехмерная (4D) стабильность, указывающая на оптимизацию аналитического метода и прогнозирование эффективности анализа с использованием отслеживания пиков МС и УФ

Бласко А., Там Дж., Ахмад ИАХ, Гунасекера С., Ощепкова И., Галин, Андрей Важенцев А., Ташлицкий В. и Адамс Д.

Всего 60 пиков, полученных в результате принудительной деградации трех активных фармацевтических ингредиентов (АФИ), были использованы для выбора колонки при разработке аналитического метода ВЭЖХ-УФ, указывающего на стабильность, с использованием отслеживания пиков ЖХ-УФ и ЖХ-МС. Две добавки подвижной фазы и два органических модификатора были оценены при скрининге списка тщательно выбранных хроматографических колонок. Был использован скрининг колонок, и лучшая колонка была выбрана на основе общего количества разрешенных пиков, разрешений, ширины пиков и формы пиков. 0,1% ТФУ в ACN/воде использовалось для начального скрининга и оптимизации профиля градиента. Также были оценены три различные концентрации ТФУ в ACN/воде. Оптимальная концентрация ТФУ, 0,10% (8,77 мМ), считалась оптимальной для дальнейшей оптимизации градиента на основе разрешения критических пар. После выбора колонки, подвижной фазы и выбора модификатора подвижной фазы (ТФУ), оптимизация градиента была достигнута путем комбинации автоматического хемометрического отслеживания пиков и решений на основе программного обеспечения в AutoChrom MS. Правильные уравнения удерживания пиков (т. е. соотношение времени удерживания и подвижной фазы) были получены с использованием первых одношаговых градиентов с широким диапазоном % B, за которыми последовала оптимизация в многошаговых градиентах. Было обнаружено, что экстраполяция с использованием квадратичных моделей удерживания может привести к большим ошибкам в прогнозах времени удерживания (tR), особенно для плохо удерживаемых компонентов. Мы представляем проблемы при разрешении критических пар разрешения, включая пары с одинаковым m/z, переоценку и ошибки прогнозирования программного обеспечения, а также то, почему модель пиков (т. е. точность предсказанного по сравнению с экспериментальным) терпит неудачу в крайних точках градиента. Используя этот подход, мы смогли создать подходящий хроматографический метод, указывающий на стабильность, для чрезвычайно сложного образца, состоящего из трех активных фармацевтических ингредиентов (АФИ) и связанных с ними продуктов деградации с широким диапазоном гидрофобности. АФИ были внутренними соединениями, их идентичность в этой статье не раскрывается и не имеет значения для целей исследования. Были получены хорошие совпадения между предсказанным и экспериментальным временем удерживания отслеживаемых пиков. Модель пика использовалась для создания метода анализа/эффективности с использованием только вычислительного инструмента.