Журнал противовирусных и антиретровирусных препаратов
Открытый доступ

Абстрактный

Новый высокопроизводительный скрининговый анализ для выявления ингибиторов взаимодействия белка gp120 ВИЧ-1 с DC-SIGN

Туонг Х. Тран, Раша Эль Баз, Андреа Куконати, Джеймс Артос, Пуджа Джайн и Зафар К. Хан

В отчете ЮНЭЙДС за 2010 год говорится, что около 34 миллионов человек живут с вирусом иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1), несмотря на высокоактивную антиретровирусную терапию (ВААРТ). Несмотря на эффективность, АРВ-терапия имеет много недостатков, включая неустойчивую для экономически неблагополучных стран траекторию затрат, серьезные побочные эффекты и развитие штаммов, устойчивых к лекарствам. В настоящее время предпринимаются некоторые меры по разработке альтернатив АРВ-терапии, особенно для контроля ранней стадии инфекции ВИЧ-1, но отсутствие эффективных лекарственных мишеней и анализов затрудняет поиск потенциальных молекул АРВ. Дендритные клетки, присутствующие в слизистой ткани, вместе с CD4+ Т-лимфоцитами и макрофагами, являются одними из первых клеток, которые сталкиваются с ВИЧ-1. Молекула межклеточной адгезии, специфичная для дендритных клеток, -3-захватывающая нонинтегрин (DC-SIGN) играет решающую роль в связывании ВИЧ-1 посредством высокоаффинного взаимодействия с гликопротеином оболочки вируса gp120. DC-SIGN, связывающий маннозу лектин C-типа, экспрессируемый на клетках слизистой оболочки прямой кишки, матки и шейки матки, способствует раннему инфицированию ВИЧ-1 после половой передачи. В этом исследовании мы сообщаем о новом целевом высокопроизводительном скрининговом анализе (HTS), способном количественно оценить связывание, а также ингибирование DC-SIGN и gp120. Специфичность анализа определялась с помощью конкурентного ингибирования, в то время как оптимизация проводилась для толерантности к ДМСО (0,5%), фактора Z' (0,51), отношения сигнал/шум (3,26) и коэффициента вариации (5,1%). Для проверки анализа были протестированы ранее признанные антагонисты связывания DC-SIGN/gp120 для обнаружения ингибирования, что демонстрирует пригодность анализа для будущего скрининга HTS потенциальных ингибиторов, которые блокируют связывание между DC-SIGN и gp120, что может предотвратить раннее инфицирование ВИЧ-1.