Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Быстрый метод выделения растительных пептидов на основе их полярности с использованием флэш-хроматографии BIOTAGE Isolera One

Эуи Микаэль Бедику, Раджан Логеш, Себастьян Ламин Ниамке, Паланисвами Дханабал

Несколько лет опыта проведения колоночной хроматографии были сжаты в простые руководящие принципы, полезные для перевода результатов тонкослойной хроматографии (ТСХ) в изократическую или градиентную флэш-хроматографию. В настоящем исследовании описывается использование такого протокола с картриджем с силикагелем Biotage SNAP KP-Sil 10 г (21 мм × 55 мм, размер частиц 50 мкм) для очистки за один шаг четырех (4) пептидов из сырого белкового экстракта проросших семян Amaranthus hybridus. Лучшей используемой системой растворителей была комбинация н-гексана (неполярный растворитель B от 5% до 0% конечной концентрации) и смеси полярных растворителей (растворитель A), состоящей из ацетонитрила, н-бутанола, ледяной уксусной кислоты и воды в соотношении 0,9:2:1:1 соответственно. Элюирование проводилось в нормальной фазе с линейным градиентом. Вся процедура флэш-хроматографии заняла максимум двадцать пять минут (25 мин), и было использовано менее литра (750 мл) общего количества растворителей. Очищенные пептиды, названные AhPA, AhPB, AhPC и AhPE, показали очевидную однородность на пластинах ТСХ, а выход очистки составил около 11,15%, 10,38%, 14,50% и 17,25% соответственно. Эта инновационная технология обеспечивает эффективную альтернативу исследователям в очистке пептидов и участвует в сокращении отходов растворителей, гелей, времени и, следовательно, денег.