Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

Простой метод выделения, размножения, характеристики и дифференциации мультипотентных мезенхимальных стволовых клеток, полученных из костного мозга взрослых мышей

Jitendra Kumar Chaudhary and Pramod C Rath

Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) имеют веретенообразную форму, адгезивны, клоногенны, нефагоцитарны, фибробластичны и мультипотентны по своей природе и обладают внутренней способностью к самообновлению и пролиферации. Костный мозг является самым богатым источником МСК для изучения основных процессов пролиферации, самообновления и многолинейной дифференцировки. Было проведено несколько исследований по улучшению метода выделения, размножения, характеристики и дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток из костного мозга мышей, но ни одно из них не является широко приемлемым. Из-за отсутствия универсально приемлемого метода культивирования МСК в этом направлении ведутся постоянные усилия. Здесь мы сообщаем о простом методе с некоторыми тонкими модификациями, направленными на улучшение общего метода выделения, культивирования, размножения и дифференцировки МСК in vitro. Следуя этому протоколу, мы выделили МСК с типичной веретенообразной морфологией, как показано с помощью сканирующей электронной микроскопии. Эти клетки также показали экспрессию маркеров, специфичных для МСК, CD29 (98,94% ± 0,67%), CD44 (84,27% ± 7,77%), Sca-1 (92,70% ± 3,81%) с незначительной экспрессией маркеров, специфичных для ГСК, таких как CD45 (0,40% ± 0,10%), CD34 (0,15% ± 0,05%) и CD11b (0,45% ± 0,15%). Было также обнаружено, что МСК дифференцируются в мезодермальные линии, такие как адипоциты, остеоциты и хондроциты, а также в эктодермальные нейроноподобные клетки. Более того, МСК показали дифференциальную базальную экспрессию факторов транскрипции, связанных с плюрипотентностью, таких как Oct4, Nanog, Sox2 и Myc. На основании вышеизложенных результатов мы предлагаем простой протокол, который можно использовать для выделения, культивирования, размножения и характеристики мультипотентных МСК из костного мозга мышей в экспериментальных и прикладных целях.