Журнал клинической и экспериментальной офтальмологии
Открытый доступ

Абстрактный

Измененные профили экспрессии и метилирования ДНК гена ERCC6 в тканях хрусталика при возрастной кортикальной катаракте

Юн Ван, Говей Чжан, Фей Ли, Лихуа Кан, Цзиньдун Бен, Хан Жун и Хуайцзинь Гуань

Повреждение ДНК, вызванное ультрафиолетом (УФ), связано с патогенезом возрастной катаракты (ARC) и восстанавливается посредством нуклеотидной эксцизионной репарации (NER). Известно, что белок группы комплементации B синдрома Коккейна (CSB), кодируемый ERCC6, является компонентом комплекса NER. Метилирование ДНК является одним из основных эпигенетических событий и катализируется ДНК 5-цитозин-метилтрансферазами (DNMT). Целью данного исследования было изучение потенциального вклада метилирования ДНК CpG-островков в области промотора ERCC6 в тканях хрусталика в патогенез ARC. В данное исследование были включены пятнадцать кортикальных линз ARC и пятнадцать прозрачных линз от людей. Экспрессия ERCC6 и DNMT в линзах была проанализирована с помощью qRT-PCR и вестерн-блоттинга. Для оценки статуса метилирования ERCC6 была проведена бисульфитная ПЦР (BSP). Эксперимент in vitro с добавлением деметилирующего агента 5-аза-2'-дезоксицитидина (5-аза-dC) в эпителий хрусталика человека B-3 (HLE B-3) был проведен для подтверждения роли метилирования ДНК в экспрессии ERCC6. Результаты показывают, что уровни мРНК и белка ERCC6 были значительно снижены в LEC и корковом веществе хрусталика ARC. Уровень мРНК DNMT3b был значительно выше в LEC ARC, чем в контрольной группе. В группе ARC остров CpG в промоторной области ERCC6 показал гиперметилирование в LEC по сравнению с контрольной группой. После лечения 5-аза-dC уровень белка ERCC6 увеличился в HLE B-3. Мы пришли к выводу, что сверхэкспрессия DNMT3b в хрусталике связана с гиперметилированием острова CpG ERCC6, что связано со сниженной экспрессией ERCC6 в LEC у пациентов с ARC. Это эпигенетическое изменение в гене ERCC6 может быть фактором формирования ARC, опосредованным нарушением репарации ДНК.