ISSN: 2155-9899
Шарлин Д. Янг и Джонатан Б. Энджел
Изучение человеческих тимоцитов требует соответствующей матрицы для обеспечения надлежащего функционирования тимоцитов. Хотя клетки OP9-DL1 хорошо зарекомендовали себя как идеальная система совместного культивирования для генерации Т-клеток из их предшественников, их способность поддерживать смешанную популяцию зрелых человеческих тимоцитов для исследований ВИЧ-инфекции in vitro еще не установлена. Мы оценили эффекты совместного культивирования гетерогенной популяции зрелых человеческих тимоцитов с клеточной линией, полученной от мышей (OP9), трансдуцированной лигандом notch delta like 1 (OP9-DL-1), и сравнили это со стандартным совместным культивированием с человеческими эпителиальными клетками тимуса (TEC). Совместное культивирование тимоцитов с клетками OP9-DL1 привело к более высокой жизнеспособности и более низкому апоптозу по сравнению с совместными культурами TEC. Распределение подгрупп и экспрессия CD127 тимоцитов немного различались между условиями. Тимоциты, совместно культивируемые с клетками OP9-DL1, имели более низкую долю клеток CD3 + DP и более высокую долю клеток SP4 по сравнению с совместными культурами TEC. Зрелые клетки CD3 + CD4 + CD8 - (SP4) также имели более низкие уровни экспрессии CD127 в культурах OP9-DL1 по сравнению с TEC. Стимуляция тимоцитов интерлейкином-7 привела к снижению экспрессии CD127 в совместных культурах OP9-DL1, как ранее наблюдалось с совместными культурами TEC. Тимоциты, совместно культивируемые с OP9-DL1, имели тенденцию к более высоким уровням фосфорилирования STAT-5, индуцированного IL-7, и имели более высокие уровни экспрессии Bcl-2, индуцированной интерлейкином-7. Клетки OP9-DL1 обеспечивают микросреду, которая является пермиссивной для ВИЧ-инфекции в тимоцитах in vitro . Совместное культивирование тимоцитов с OP9-DL1 облегчит изучение тимоцитов человека и поможет в изучении экзогенных стимулов или инфекции на отдельных субпопуляциях тимоцитов.