Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Анализ ЖХ/МС для анализа вориностата в сыворотке и моче крыс: применение в доклиническом фармакокинетическом исследовании

Элхам А. Мохамед, Махасен М. Мешали, Кейси Л. Сейр, Стефани Э. Мартинес, Конни М. Ремсберг, Джоди К. Такемото, Танаа М. Борг, Абдель Монем М. Фода и Нил М. Дэвис

Полезность методов жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии, о которых сообщалось в настоящее время, для количественного определения вориностата в плазме или сыворотке может быть ограничена. Эти методы используют трудоемкие и дорогостоящие процедуры, такие как твердофазная экстракция, или методы с ограниченным доступом, такие как высокотурбулентная жидкостная хроматография в сочетании с переключением колонок. В этом исследовании предлагается простой изократический метод ЖХ/МС, проверенный для определения вориностата как в сыворотке крови, так и в моче крыс. Белки осаждали из сыворотки с использованием ледяного ацетонитрила, а в качестве внутреннего стандарта использовали даидзеин. Разделение достигалось с использованием колонки Phenomenex Luna ® C 18 (2) (5 мкм, 250 x 4,60 мм) и изократического элюирования с подвижной фазой, состоящей из ацетонитрила, воды и муравьиной кислоты (30:70:0,1, об./об./об.). Использовалось масс-спектрометрическое обнаружение с использованием ионизации в положительном режиме электрораспылением с выбранным мониторингом ионного обнаружения. Калибровочные кривые были линейными в диапазоне от 0,05 до 50 мкг/мл в сыворотке и от 0,5 до 25 мкг/мл в моче. В обеих биологических матрицах точность анализа составила <15% (RSD), а внутри- и межпрогонное смещение было в приемлемом диапазоне (–15% до 15%). Никакой деградации вориностата в обеих матрицах не было обнаружено после трех циклов замораживания-оттаивания и 24-часового хранения в автоинжекторе. Нижний предел количественного определения в сыворотке и моче крыс составил 0,05 и 0,5 мкг/мл соответственно. Верхний предел количественного определения в сыворотке и моче крыс составил 50 и 25 мкг/мл соответственно. Этот анализ был успешно применен для доклинического исследования фармакокинетики вориностата у крыс.