Журнал гликомики и липидомики
Открытый доступ

Абстрактный

Аналитическая гликомика: Биофармацевтическое применение

Андраш Гуттман

Полная характеристика N-гликозилированных фрагментов биофармацевтических препаратов имеет большое значение, особенно когда гликоварианты могут влиять на биологический эффект. Более половины новых поколений протеиновых терапевтических препаратов представляют собой моноклональные антитела, в которых присоединенные олигосахариды влияют не только на их физико-химические свойства и стабильность, но и на их активность связывания с рецепторами, период полураспада в кровотоке и, что не менее важно, на их иммуногенность. Поэтому высокопроизводительные гликоаналитические методы пользуются большим спросом для анализа N-гликозилирования терапевтических антител, особенно во время отбора клонов, разработки процесса и выпуска партии. Анализ сложных углеводов является очень сложной задачей из-за отсутствия у них хромофорной/флуорофорной активности и во многих случаях легко ионизируемых групп, что требует дериватизации перед анализом, опосредованным электрическим полем. Полная характеристика N-гликозилирования может также потребовать секвенирования с последовательными этапами переваривания экзогликозидазой, за которыми следует анализ капиллярным электрофорезом. В этой презентации будут представлены современные методы разделения жидкой фазы для всестороннего структурного выяснения N-гликозилирования белков, в основном с использованием капиллярного электрофореза и его комбинации с масс-спектрометрией (CESI-MS). С помощью развивающейся области гликоинформатики будет продемонстрировано назначение идентичности разделенных структур гликанов с использованием недавно представленного программного обеспечения GUcal.