Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

Применение гипоксии для создания моделей эпителиально-мезенхимального перехода в клеточных линиях почечно-клеточной карциномы

Баоань Хун, Чанхуа Чжоу, Синь Ду, Сики Чен, Сяоху Дэн, Шайирему Дуэркунь, Цин Ли, Юн Ян, Кан Гун и Нин Чжан

Цель: Установить модели эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП) в клеточных линиях почечно-клеточной карциномы с помощью гипоксии, вызванной CoCl2.
Материалы и методы: В эксперименте использовались клеточные линии почечно-клеточной карциномы A498 и 786-O, а для моделирования гипоксии использовался CoCl2. Раковые клетки культивировались с различными концентрациями CoCl2. Были выявлены изменения морфологии и цитоактивности для получения оптимальной концентрации CoCl2 для моделирования гипоксии. После обработки CoCl2 клетки подвергались анализу вестерн-блоттинга для проверки экспрессии HIF-1α и изменений молекул, связанных с ЭМП (E-кадгерин, фибронектин).
Результаты: Клеточные соединения групп, обработанных CoCl2, были рыхлыми и разбросанными по сравнению с контролем. Влияние CoCl2 на жизнеспособность клеток A498 не было выражено при низкой дозировке, но когда концентрация CoCl2 достигала 250 мМ, активность клеток постепенно снижалась. Напротив, CoCl2 индуцировал пролиферацию клеток 786-O в диапазоне 50 мМ-200 мМ, но подавлял рост клеток при дозировках выше 200 мМ. Экспрессия E-кадгерина была значительно снижена, а фибронектин был повышен в обеих клеточных линиях A498 и 786-O при гипоксии, смоделированной CoCl2, по сравнению с нормоксическими условиями (P<0,01).
Выводы: Модели ЭПТ клеточных линий почечно-клеточной карциномы были успешно созданы с помощью гипоксии, вызванной CoCl2. Модели помогут нам в дальнейшем изучении механизмов ЭПТ и исследовании новых терапевтических мишеней для ингибирования инвазии опухоли и метастазирования.