Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

Мононуклеарные клетки, полученные из костного мозга, дифференцируются в гепатоцитоподобные клетки в течение нескольких часов без слияния

Ursula Matte, Carolina Uribe Cruz, Monica Lujan López, Laura Simon, Fabiana Quoos Mayer and Roberto Giugliani

Предыстория: Клеточная терапия с использованием мононуклеарных клеток костного мозга (BMMC) была показана как потенциальное лечение заболеваний печени. BMMC может действовать путем слияния, дифференциации в гепатоцитоподобные клетки и/или секреции паракринных факторов. Здесь мы использовали инкапсулированные BMMC в модели острого повреждения печени, вызванного четыреххлористым углеродом (CCl4), для изучения дифференциации BMMC in vivo и in vitro.

Методы: Исследования in vitro и in vivo проводились на крысах Wistar, подвергшихся острому поражению печени, вызванному CCl4. BMMC были выделены из крыс Wistar и инкапсулированы в микрокапсулы альгината натрия. Для экспериментов in vivo животные получали инкапсулированные BMMC через 24 часа после введения CCl4, а капсулы собирали в течение 6, 24 и 48 часов (группа tCCl4). Для экспериментов in vitro изолированные гепатоциты от животных с поражением печени, вызванным CCl4, совместно культивировались с инкапсулированными BMMC в течение 6 часов (группа cCCl4). Контрольные группы не подвергались введению CCl4. Содержание внутриклеточных липидных капель в гепатоцитах использовалось для оценки поражения печени. Дифференциация BMMC оценивалась с помощью ОТ-ПЦР на предмет гепатических генов и способности вырабатывать и секретировать мочевину.

Результаты: Повреждение печени было подтверждено у животных, получавших лечение CCl4, по наличию внутриклеточных липидных капель в гепатоцитах и ​​характерному виду печени, напоминающему мускатный орех. Полученные инкапсулированные BMMC из группы tCCl4 экспрессировали маркеры гепатоцитов, такие как цитокератин 18 и альбумин, через 48 часов после лечения. С другой стороны, BMMC из группы cCCl4 показали экспрессию альбумина через 6 часов после совместного культивирования. Продукция мочевины была увеличена в BMMC из группы cCCl4, но не в cControl. BMMC из групп tControl или cControl не экспрессировали маркеры гепатоцитов ни в одной точке времени.

Выводы: В этом исследовании мы показываем, что BMMC дифференцируются в гепатоцитоподобные клетки за короткий промежуток времени как in vivo, так и in vitro. Эта дифференциация запускается паракринными факторами, присутствующими только в поврежденной печени.