Журнал клинической и клеточной иммунологии
Открытый доступ

Абстрактный

Расширение специфичных для рака CTL с помощью биореактора ZYX

Юнсинь Чжан, Ин Ван, Чжэньсян Ван, Моника Чжан и Чжэньин Ван

Цель: использование терапевтических иммунных подмножеств клеток становится все более экономически эффективной и привлекательной стратегией для лечения рака. Тем не менее, область клеточной терапии затруднена невозможностью последовательно генерировать и расширять достаточное количество высококачественных клеток у большинства пациентов. Для решения этой критической проблемы исследователи разработали сложную технологию биореактора, которая максимизирует метаболическую поддержку и минимизирует разрушительные силы напряжения сдвига, автоматически отслеживает функциональные корреляты, чтобы обеспечить сбор клеток на пике функциональной способности, и позволяет сортировать клетки in situ, чтобы минимизировать потерю клеток и микробное загрязнение. В текущем исследовании будет проверена установленная система расширения ЦТЛ, специфичная для рака, на ее способность уничтожать раковые клетки как in vitro, так и in vivo.

Методы: Для проверки эффективности клеточного расширения биореактора ZYX, CD8+ T-клетки, расширенные в различных системах культивирования, были подсчитаны с помощью проточной цитометрии, а активность цитотоксических Т-лимфоцитов (CTL), специфичных для рака, была измерена для их продукции цитокинов и против аутологичных опухолевых мишеней с помощью анализа цитотоксичности CTL in vitro и in vivo, а также окрашивания аннексином V для обнаружения низкоуровневой цитолитической активности. В анализе CTL in vivo линия клеток рака мыши использовалась в качестве стимуляторов и мишеней для оценки расширенных мышиных CTL у мышей BALB/c, а клетки рака легких человека и расширенные человеческие CTL были введены иммунодефицитным мышам для оценки человеческих CTL.

Результаты: По сравнению с другими системами культивирования клеток, биореактор ZYX имеет значительно более высокую эффективность в расширении специфичных для рака CD8+ T-клеток, и эти CD8+ T-клетки, расширенные в биореакторе ZYX, продемонстрировали более высокую специфическую цитотоксичность CTL как в исследованиях in vivo, так и in vitro.

Заключение:  Биореактор ZYX может обеспечить адекватную метаболическую поддержку растущим раковым CD8+ CTL и надлежащие условия для стимуляции антигенов, переносимых раковыми клетками, к CTL.