Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

Характеристика стратегии доставки гена для липофекции с использованием человеческого сывороточного альбумина

Robert W Arpke and Pi-Wan Cheng

Мы сообщаем о характеристике стратегии облегченной липофекции, которая использует формулу, приготовленную с человеческим сывороточным альбумином, DMRIE-C и pCMV?. Трансфекционные комплексы в формуле липофекции, содержащей альбумин, были охарактеризованы по размеру с помощью светорассеяния, внутриклеточному перемещению с помощью конфокальной микроскопии и механизму поглощения ингибиторами. Дополнение формулы DMRIE-C плюс pCMV? альбумином повышает эффективность липофекции в 8-9 раз и размер комплексов в 2-2,5 раза, как измерено с помощью светорассеяния. Анализ внутриклеточного перемещения трансфекционных комплексов с помощью конфокальной микроскопии выявляет колокализацию ДНК и альбумина в цитоплазме и ядре. Предварительная обработка клеток хлорпромазином или избытком альбумина, цитохалазина B или комплексов филипина приводит к ингибированию эффективности трансфекции на 20%, 55% или ни к какому, соответственно. Результаты свидетельствуют об умеренном участии клатрина, значительном участии актинассоциированного макропиноцитоза и отсутствии участия кавеол в поглощении трансфекционных комплексов, приготовленных с человеческим сывороточным альбумином, DMRIE-C и pCMV?.