Журнал лекарственного метаболизма и токсикологии
Открытый доступ
ISSN: 2157-7609
ISSN: 2157-7609
Джозеф М. Кови, Джоэл М. Рид, Сара А. Бухров, Мэри Куффел, Чад Уолден, Хольгер Берсинг и Мэтью М. Эймс
Предыстория: Батрацилин является гетероциклическим ингибитором ариламиновой топоизомеразы с доклинической противораковой активностью. Были отмечены выраженные видовые различия в чувствительности к токсичности батрацилина, которые были приписаны дифференциальному образованию N-ацетилбатрацилина N-ацетилтрансферазой. Испытание фазы I батрацилина у онкологических больных с генотипами медленного ацетилирования выявило ограничивающую дозу токсичность геморрагического цистита. Для дальнейшего изучения метаболизма батрацилина и N-ацетилбатрацилина у разных видов были проведены подробные исследования с использованием препаратов микросом и гепатоцитов печени человека, крысы и собаки. Методы: Батрацилин или N-ацетилбатрацилин инкубировали с микросомами и гепатоцитами из печени человека, крысы и собаки и с микросомами человека и крысы, экспрессирующими CYP. Субстраты и метаболиты анализировали с помощью ВЭЖХ с диодной матрицей, флуоресцентным, радиохимическим или масс-спектрометрическим обнаружением. Ковалентное связывание радиоактивно меченого батрацилина и N-ацетилбатрацилина с белком и ДНК измерялось в микросомах печени крысы, человека и собаки, индуцированных 3-метилхолантреном, и с рекомбинантными человеческими цитохромами P450. Результаты: в микросомальных препаратах потеря батрацилина сопровождалась образованием одного гидроксилированного метаболита в микросомах печени человека и пяти гидроксилированных метаболитов в микросомах печени крысы. Шесть моно- или дигидрокси-N-ацетилбатрацилина были обнаружены при инкубации этого соединения с микросомами печени крысы 3MC. Для некоторых метаболитов были идентифицированы сайты гидроксилирования с использованием дейтерированных субстратов. Инкубация с рекомбинантными цитохромами P450 идентифицировала rCYP1A1, rCYP1A2, hCYP1A1 и hCYP1B1 как основные изоформы CYP, которые метаболизируют батрацилин и N-ацетилбатрацилин. Конъюгаты глюкуронида батрацилина также были идентифицированы в инкубациях гепатоцитов. НАДФН-зависимое ковалентное связывание с белком и ДНК было обнаружено во всех оцененных препаратах батрацилина и большинстве препаратов N-ацетилбатрацилина. Выводы: Микросомальный метаболизм батрацилина и N-ацетилбатрацилина приводит к образованию множественных гидроксилированных продуктов (включая возможные гидроксиламины) и конъюгатов глутатиона. Инкубация батрацилина с гепатоцитами привела к образованию в основном глюкуронидов и других конъюгатов. Не было четкого различия в метаболизме батрацилина и N-ацетилбатрацилина между видами, которое могло бы объяснить дифференциальную токсичность.