Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ
ISSN: 2157-7013
ISSN: 2157-7013
Екатерина Семенова, Евгениуш К. Махай и Томаш Олдак
Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) являются хорошим источником для клеточной терапии благодаря своим возможностям. МСК оказывают очень важные иммуномодулирующие эффекты: они подавляют пролиферацию Т- и В-клеток и функцию естественных клеток-киллеров, а также ограничивают экспрессию главного комплекса гистосовместимости II. Плацента и пуповина являются наиболее удобными источниками МСК, которые не влекут за собой этических проблем. Кроме того, доставка плаценты и изоляция пуповины не связаны со сложным или инвазивным методом. МСК из студня Вартона и плаценты (амнион, хорион, ворсины, базальная децидуальная оболочка) были выделены по протоколу: механически и ферментативно (расщепление коллагеназой). Потенциал пролиферации оценивали с помощью анализа ФДТ. Для мультидифференцировки МСК клетки инкубировали в различных средах для дифференцировки в течение 2-3 недель при температуре 37°C в атмосфере с 5% CO2 и влажностью 90%.
Мы успешно изолировали МСК из плаценты и пуповины. Механическая изоляция была возможна для всех типов тканей. В случае ферментативного переваривания пуповины нам удалось получить МСК только в ограниченном количестве, недостаточном для дальнейшего анализа.
Все выделенные МСК имели типичную фибробластическую морфологию, экспрессировали маркеры клеточной поверхности (CD73, CD90, CD105), не экспрессировали гемопоэтические и эндотелиальные маркеры и дифференцировались в остеоциты, хондроциты и адипоциты, что является набором возможностей, рекомендованным Международным обществом клеточной терапии. Мы не заметили существенных различий в морфологии или дифференциации между клетками из-за ткани происхождения и метода выделения. И переваривание коллагеназой, и механическое разрезание привели к большому количеству собранных клеток, но использование фермента ускоряет этот процесс.