Журнал гликомики и липидомики
Открытый доступ

Абстрактный

Сравнение микрогетерогенности гликозилирования фолликулостимулирующего гормона с помощью количественной отрицательной нано-электроспрей масс-спектрометрии олигосахаридов, высвобождаемых пептид-N-гликаназами

Джордж Р. Боусфилд, Владимир Ю. Бутнев, Уильям К. Уайт, Аарон Смолтер Холл и Дэвид Дж. Харви

Гликаны из шести высокоочищенных препаратов hFSH были высвобождены путем переваривания пептид-N-гликаназой и проанализированы с помощью отрицательного режима нано-ESI масс-спектрометрии до и после переваривания нейраминидазой. Структуры гликанов гипофиза были в основном высокоманнозными, ди-, три- и тетраантенными, и их распространенность в значительной степени соответствовала той, о которой сообщали другие исследователи, использующие другие подходы. Для большинства препаратов FSH различия в гликозилировании, по-видимому, ограничивались относительной распространенностью основных семейств гликанов, как определено их нейтральными основными олигосахаридными структурами. Качественные различия между популяциями гликанов в значительной степени были отнесены к тем видам, которые были наименее распространены. Значительные качественные различия были отмечены в двух случаях. Рекомбинантные триантенные гликаны GH3-hFSH, по-видимому, имели третью антенну исключительно на ветви маннозы6, в отличие от всех триантенных гликанов гипофиза и мочи hFSH, в которых эта антенна была прикреплена исключительно к ветви маннозы3. Гипогликозилированный препарат hFSH, выделенный из очищенного hLH, был украшен гликанами с высоким содержанием маннозы, которые составили более 40% от общего количества в этой популяции. Поскольку было обнаружено, что этот препарат последовательно в 20 раз более активен, чем hFSH24 в анализах связывания рецептора FSH, по-видимому, необходимо учитывать как макрогетерогенность, так и микрогетерогенность в препаратах FSH.