ВИЧ: текущие исследования
Открытый доступ

Абстрактный

Цитоплазматическое распределение ВИЧ-1 Tat сенсибилизирует Т-клетки Jurkat к токсичности, вызванной сульфаметоксазолом-гидроксиламином

Kemi Adeyanju, Gregory A. Dekaban and Michael J. Rieder

Предыстория: Одним из лекарств, обычно используемых ВИЧ-1-инфицированными лицами, является антимикробный сульфаметоксазол (SMX), который используется для лечения и профилактики пневмоцистной пневмонии. Однако SMX отвечает за очень высокую частоту возникновения побочных реакций на лекарственные препараты (ADR) гиперчувствительности в популяции ВИЧ-1. Хотя патофизиология ADR в целом неизвестна, ADR, опосредованные сульфаметоксазолом, были связаны с его реактивным метаболитом сульфаметоксазол-гидроксиламином (SMX-HA). Наша предыдущая работа показала, что повышенная экспрессия белка Tat ВИЧ-1 в Т-клетках коррелирует с повышенным апоптозом после инкубации с SMX-HA. В этом исследовании мы стремились определить область белка Tat, ответственную за этот эффект, и механизм, посредством которого Tat способствует опосредованному SMX-HA апоптозу.
Методы: Мы установили линии клеток Jurkat T и Cos 7, которые стабильно экспрессировали полноразмерный Tat (Tat101) и делеционные мутанты (Tat86, Tat72, Tat48 и TatΔ). Затем эти линии клеток инкубировали с SMX-HA и анализировали на жизнеспособность клеток и продукцию активных форм кислорода (ROS). Далее мы использовали конфокальную микроскопию для оценки внутриклеточного распределения белков Tat и для определения того, способствуют ли изменения в экспрессии и/или локализации ключевых белков цитоскелета апоптозу, опосредованному Tat, после обработки SMX-HA.
Результаты: Удаление областей Tat, которые приводят к повышенному накоплению цитоплазмы, значительно способствовало повышенной гибели клеток в присутствии SMX-HA. Повышенная гибель клеток не требовала индукции ROS. Количественный анализ также показал, что линии клеток, экспрессирующих Tat, имели значительно более низкие уровни β-актина и α-тубулина как до, так и после обработки SMX-HA. Повышенная цитоплазматическая локализация Tat коррелировала с большими нарушениями в распределении актиновых филаментов.
Заключение: Присутствие цитоплазматического Tat в линиях T и эпителиальных клеток увеличивает их чувствительность к клеточной смерти, вызванной SMX-HA, эффект, опосредованный первыми 48 аминокислотами TAT.