Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Разработка и валидация метода жидкостной хроматографии с электрохимическим детектированием для количественного определения гидроксимочевины в плазме и водных растворах человека

Анар Родригес, Дельфин Бёкенс, Николь Дебуж, Беатрис Гулбис и Фредерик Коттон

Гидроксимочевина — уникальный препарат, показавший значительную эффективность при лечении серповидноклеточной анемии. Мы разработали метод жидкостной хроматографии с электрохимическим обнаружением для анализа гидроксимочевины в плазме и водных растворах. Аналитические цели включали аналитический диапазон от 2 до 50 мг/л, общую погрешность менее 15% и общую ошибку менее 30%. После осаждения белка ацетонитрилом разделение проводили на колонке C18 Atlantis T3 и элюировали ацетатом натрия 25 мМ, ацетонитрилом 2,5%, pH 6,5. В качестве внутреннего стандарта использовали тиоацетамид. Метод был линейным для концентраций препарата от 0,5 до 50 мг/л, а восстановление составляло от 100 до 120%. Внутридневная точность была ниже 6,0%, а междневная точность была ниже 11%. Предел обнаружения составил 0,18 и 0,63 мг/л для водного раствора и плазмы соответственно, а предел количественного определения составил 1,0 и 1,2 мг/л для водного раствора и плазмы соответственно. Не наблюдалось помех от мочевины. Разработанный метод жидкостной хроматографии может использоваться для фармакокинетических исследований в плазме и других биологических образцах, таких как слюна или моча. Он требует небольших объемов образцов и простой предварительной обработки и позволяет проводить прямое измерение недериватизированной гидроксимочевины.