ISSN: 2161-038X
Янру Чжан
Целью данного исследования было выделение и культивирование мезенхимальных стволовых клеток пуповины человека (hUMSC) in vitro путем прикрепления тканевых блоков для изучения их биологических характеристик. hUMSC культивировались до пассажа 3, после чего были проведены индукционные эксперименты in vitro и индуцированы в меланоциты, нейроны и остеобласты. Результаты обратной транскрипционной полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) показали, что экспрессия Nanog Homeobox (NANOG), Pou Class 5 Homeobox 1 (OCT4), 5'-нуклеотидазы экто (CD73), молекулы CD44 (CD44) в мезенхимальных стволовых клетках, полученных из пуповины, была положительной, а время удвоения популяции составило 24,7 часа. Дифференциальные свойства нейрогенеза и остеогенных клеток были подтверждены гистологическим окрашиванием с использованием толуидинового синего и ализаринового красного. Меланоциты были обнаружены с помощью ОТ-ПЦР, количественной ПЦР (кПЦР) и иммунофлуоресцентного окрашивания. Через 28 дней дифференциации клетки демонстрировали типичную морфологию, такую как биполярные или триполярные клетки с тонкими дендритами. Иммунофлуоресцентное окрашивание показало, что дифференцированные клетки экспрессировали фактор транскрипции микрофтальмии (MITF) и тирозиназу (TYR), экспрессия MITF, TYR и тирозинкиназы рецептора протоонкогена KIT (KIT) от 0 до 28 дней по кПЦР значительно отличалась, а экспрессия генов-маркеров MITF, SOX10, KIT по ОТ-ПЦР была положительной. Результаты показали, что клетки, выделенные из человеческой пуповины, были мезенхимальными стволовыми клетками, а hUMSC имели потенциал мультидифференцировки. hUMSC также могли дифференцироваться в меланоциты in vitro, обеспечивая надежные источники меланоцитов для лечения витилиго в будущем.