Журнал клинической и клеточной иммунологии
Открытый доступ

Абстрактный

Mycobacterium tuberculosis вызывает экспансию Foxp3-положительных CD4 Т-клеток с регуляторным профилем у здоровых субъектов, не сенсибилизированных к туберкулину: значение для эффективной иммунизации против туберкулеза

Кристина С. Хирш, Роксана Рохас, Мианда Ву и Захра Тоосси

Цель: Инфицирование MTB или воздействие компонентов MTB связано с интенсивной микробной стимуляцией иммунной системы как через антигенные, так и через TLR-компоненты, а также индукцией среды, богатой провоспалительными/противовоспалительными цитокинами. Здесь мы рассмотрели основу индуцированного расширения регуляторных Т-клеток (iT-reg) в ответ на стимуляцию MTB при отсутствии предшествующей реакции Т-клеток на антиген.
Методы: PBMC от неинфицированных ВИЧ-1 TST-отрицательных и TST-положительных контрольных субъектов стимулировались вирулентным лизатом MTB H37Rv (L), препаратом MTB, полученным методом французского прессования, который включает все бактериальные компоненты. Фенотип MTB H37RvL, индуцированного iT-reg, оценивался с помощью иммуноокрашивания и проточной цитометрии. Функциональная способность iT-reg оценивалась с использованием включения ³ H-тимидина и продукции IFNγ неадгезивных Т-клеток (NAC) в присутствии или отсутствии iT-reg в соответствующих культуральных супернатантах в ответ на стимуляцию TCR. ПЦР в реальном времени использовалась для оценки экспрессии IDO и FoxP3 мРНК.
Результаты: способность MTB H37RvL индуцировать CD4 ⁺ CD25 ^hi+ Foxp3 ^{+ T-клетки в PBMC от TST-отрицательных субъектов была надежной (p < 0,001) и фактически сопоставима с индукцией iT-reg в PBMC от TST-положительных субъектов. CD4 +} CD25 ^hi+ T-reg , индуцированные MTB, были TGFβ-положительными (p < 0,05). Кроме того, MTB H37RvL индуцировал CD4 ⁺ CD25 ^hi+ Foxp3 ⁺ iT-reg, подавляя включение ³ H-тимидина и продукцию IFNγ неадгезивных Т-клеток (NAC) в ответ на стимуляцию TCR. Индукция MTB H37RvL iT-reg была значительно сильнее (p < 0,01), чем индукция лигандами TLR-2, TLR-4, TLR-9 или комбинацией всех лигандов TLR. MTB H37RvL индуцировал экспрессию мРНК индоламин 2,3-дидезоксигеназы (IDO) в моноцитах (p < 0,001), а совместное культивирование с ингибитором IDO, D-1MT, снижало частоту T-reg (p < 0,05). Ингибирование TGFβ с помощью siRNA снижало экспрессию мРНК Foxp3 в Т-клетках CD4 (p < 0,05).
Заключение: Таким образом, MTB и его компоненты расширяют функциональные iT-reg в человеческих мононуклеарных клетках от MTB несенсибилизированных субъектов. Кроме того, MTB-индуцированное расширение iT-reg зависит от экспрессии мононуклеарными фагоцитами как TGFβ, так и IDO.