Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Полная валидация метода биоанализа высокого разрешения ICP-MS для железа в плазме человека с K2EDTA

Моника Уитмайр, Анастасия Осредкар, Дженнифер Аммерман, Джефф Бисс, Чаоян Хуан, Трейси Маршалл, Криста Эрингер и Патрисия де Лисио

Цель: Валидация метода биоаналитической масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ИСП-МС) для количественного определения железа в плазме человека с K2ЭДТА (матрица). Этот метод был валидирован с использованием типичных параметров биоаналитической валидации. Материалы и методы: Эталонные стандарты железа и внутренний стандарт германия (IS) были получены от Ultra Scientific. Реагентная вода имела удельное сопротивление ?18 МОмсм. Азотная кислота и соляная кислота были сверхчистыми. Пустая матрица была приобретена у BioReclamation. Линейность оценивалась с использованием восьми стандартов, подготовленных в прокси-матрице в диапазоне, эквивалентном 0,5-20 мкг железа/мл матрицы в начале и конце каждого прогона. Образцы контроля качества (QC) были подготовлены путем обогащения матрицы при 0,5, 1,5, 10, 15 и 100 мкг/мл. В каждый прогон включали бланк, содержащий IS, и двойной бланк. Селективность оценивалась с использованием шести различных партий матрицы, усиленной IS и аналитом на уровне LLOQ. Для анализа подготовленных образцов использовался Thermo-Finnigan ELEMENT2 High Resolution ICP-MS. Результаты: пригодность системы, селективность, перенос и прочность соответствовали критериям приемлемости. Линейность была последовательно продемонстрирована. Извлечения для всех калибровочных стандартов и QC находились в пределах критериев приемлемости. Замораживание/оттаивание было продемонстрировано для 4 циклов. Воспроизводимость на лабораторном столе была успешной после 53 часов хранения при окружающей среде. Воспроизводимость повторного введения была успешной после 96 часов хранения при окружающей среде. Стабильность экстракта была успешной после 190 часов хранения при окружающей среде. Стабильность раствора IS была успешной после 29 дней хранения при окружающей среде. Стабильность калибровочного стандарта была успешной после 8 дней хранения при окружающей среде. Стабильность исходного раствора аналита была успешной после 29 дней хранения при окружающей среде. Длительная стабильность при хранении была успешной после 31 дня при температуре от 2 до 8°C, 31 дня при температуре от -15 до -25°C и 30 дней при температуре от ?70 до -90°C. Заключение: Этот биоаналитический метод ICP-MS был успешно проверен для количественного определения железа в плазме человека с K2EDTA.