Журнал противовирусных и антиретровирусных препаратов
Открытый доступ

Абстрактный

Генная терапия с использованием секретируемого одноцепочечного вариабельного фрагмента, нацеленного на CCR5, для ингибирования ВИЧ-инфекции

Александр Фалькенхаген, Масуд Амели, Сабах Асад, Стэнли Рид и Садна Джоши

Взаимодействие R5 ВИЧ с клеточным CCR5 является обязательным для проникновения в клетки-хозяева. Гуманизированное моноклональное антитело PRO 140 маскирует клеточный поверхностный CCR5 и эффективно блокирует инфекцию R5 ВИЧ. Хотя еженедельные введения PRO 140, как было показано, резко снижают вирусную нагрузку у пациентов, частые инъекции очищенных антител не являются ни практичными, ни экономически эффективными. Инженерия генно-модифицированных клеток или тканей для секреции терапевтических белков в местах репликации вируса может с успехом заменить постоянное введение лекарств. Мы разработали ген, кодирующий секретируемый одноцепочечный вариабельный фрагмент PRO 140, sscFvPRO140, и использовали лентивирусный вектор для его доставки и экспрессии. SscFvPRO140 эффективно секретировался из генно-модифицированных клеток, оставался стабильным в культуральном супернатанте при 37 °C и специфически связывался с клетками, экспрессирующими CCR5. Для оценки ингибирования ВИЧ-инфекции были проведены анализы однораундовой инфекции. sscFvPRO140 снизил проникновение R5 ВИЧ в немодифицированные клетки-мишени, хотя и с меньшей эффективностью по сравнению с тем, что было сообщено для родительского моноклонального антитела. Проникновение X4 ВИЧ, который использует CXCR4 в качестве корецептора, осталось неизменным. Более того, проникновение вируса было существенно снижено при инфицировании генно-модифицированных клеток-мишеней ВИЧ, экспрессирующих sscFvPRO140. Генная терапия с использованием внутриклеточно активных молекул, таких как рибозимы или нуклеазы цинковых пальцев, обеспечивает защиту только генно-модифицированным клеткам-мишеням. Напротив, предлагаемая стратегия генной терапии, основанная на секретируемых анти-ВИЧ белках, имеет потенциал для защиты как генно-модифицированных, так и немодифицированных популяций клеток-мишеней ВИЧ.