ISSN: 2165-8048
Синь Чэн, Бо Ян, Дун Лю, Л Хуан Хэ, Ган Чен, Юн Чен, Р. Фа Хуан и И Шэн Цзян
Ген уратоксидазы был клонирован в Lactobacillus bulgaria для получения уратоксидазы для разложения мочевой кислоты и лечения гиперурикемии. Используя последовательности гена уратоксидазы Candida utilis (уриказа, E12709) в GenBank, ПЦР-амплифицированные фрагменты гена уратоксидазы были вставлены в плазмиду pMG36e для построения рекомбинантной плазмиды PMG36e-U, которая затем была электротрансформирована в Lactobacillus bulgaria. Мы использовали SDS-PAGE для идентификации уратоксидазы в клеточных лизатах генетически модифицированных бактерий и для измерения активности уратоксидазы. Ген уратоксидазы был ПЦР-амплифицирован из генома Candida utilis. Рекомбинантная плазмида PMG36e-U, содержащая ген уратоксидазы, была успешно электротрансформирована в Lactobacillus bulgaria. Молекулярная масса субъединицы уратоксидазы, синтезированной генетически модифицированными бактериями, составила приблизительно 34 кДа на основе SDS-PAGE, а ферментативная активность in vitro из препарата бактерий составила до 0,33 ед./мл. Заключение: Ген уратоксидазы был клонирован в Lactobacillus bulgaria и успешно разложил мочевую кислоту.