ISSN: 2161-0401
Вэй Ван, Яне-Ши Ван и Вэньше Р. Лю
Сайт-селективная маркировка белков является незаменимым подходом в интенсивной в настоящее время области исследований химической биологии. Исследования, включающие сайт-селективную маркировку белков, охватывают от динамического анализа белков in vitro до исследования взаимодействия белок-белок в живых клетках. За последнее десятилетие было введено несколько методов для достижения сайт-селективной маркировки белков. К ним относятся генетическое слияние зеленого флуоресцентного белка и его производных, селективная химическая маркировка белков с помощью меток слияния и сайт-специфическая модификация неканонических аминокислот, которые генетически кодируются. Используя развитые ортогональные пары аминоацил-тРНК-синтетаза-бессмысловой супрессор тРНК, неканонические аминокислоты с биоортогональными функциональными группами, такими как азид, алкин, тетразин, алкен, кето, фенилгалогенид и т. д., были генетически включены в белки в клетках E. coli, дрожжей и млекопитающих. Генетическое кодирование этих неканонических аминокислот позволяет использовать множество способов сайт-селективной маркировки белков как in vitro , так и in vivo , что позволяет использовать различные стратегии для исследования функций белков. Целью этого обзора является краткое введение в метод генетического неканонического включения аминокислот и последние достижения в применении этого метода для достижения сайт-селективной маркировки белков.