Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

Пептиды гуманина регулируют поток кальция в нейрональных, глиальных и эндотелиальных клетках млекопитающих в условиях стресса

Anna Knapp, Urszula Czech, Anna Polus, Monika Chojnacka, Agnieszka Sliwa, Magdalena Awsiuk, Barbara Zapala, Dominika Malinska, Adam Szewczyk and Aldona Dembinska-Kiec

«Чуманин (HN) и гуманиноподобные вещества — это короткие полипептиды, которые предотвращают гибель нейронов и дисфункцию, связанную с прогрессированием болезни Альцгеймера. HN активирует олигомерный рецептор (комплекс CNFTR/WSX-1/gp130) во внеклеточной среде и, как полагают, взаимодействует с внутриклеточными белками, такими как семейство Bcl2. HN стимулирует путь JAK2/STAT3, который регулирует апоптоз и гибель клеток, однако точный молекулярный механизм цитопротекции, опосредованной HN, остается неизвестным. Целью нашего исследования была оценка влияния HN (HNM) и HN-подобных пептидов, которые включают HNG, HN10d и HN 10dV, на внутриклеточное высвобождение кальция в культивируемых клетках мозга (LN18, C8D1A) и эндотелиальных HUVEC в условиях стресса. Мы инкубировали клетки с небольшим количеством HN (4 мкМ) в течение 24 часов, создавали клеточный стресс путем добавления либо 25 мкМ β-амилоида (нейрональные и глиальные клетки) или 5 нг/мл TNF-α (эндотелиальные клетки); и индуцировали высвобождение кальция с 10 мкМ АТФ. Мы продемонстрировали, что HN регулирует поток кальция во всех трех типах клеток, хотя он был более выражен в эндотелиальных, чем в мозговых клетках. HNM приводит к снижению потока кальция в C8D1A, HUVEC и LN18; HN10d ? в HUVEC и 10dV ? в глиальных клетках. Мы предположили, что участок активности HN и высвобождения кальция находится в эндоплазматическом ретикулуме (ER), в котором наблюдается слегка измененная экспрессия выбранных белков, связанных со стрессом ER, при инкубации с HN. Не было никакого влияния экзогенных HN на высвобождение кальция из изолированных митохондрий. Мы продемонстрировали экспрессию мРНК HNM, HN10d и HN10dV в нейрональных клетках LN18; однако их уровни не были затронуты обработкой β-амилоидом. Это может указывать на то, что стрессовые условия вызывают внутриклеточную транслокацию HN вместо изменения экспрессии гена HN. Таким образом, возможно, что локализация HN в ER может регулировать внутриклеточные количества кальция, которые в конечном итоге определяют судьбу клетки».