Андрология-открытый доступ
Открытый доступ

Абстрактный

Идентификация дифференцировки клеток, подобных сперматогониальным стволовым клеткам, in vitro у пациента с азооспермией с использованием модифицированной среды человеческих эмбриональных стволовых клеток (HESC)

Азанти ЯВ, Локман М.И. и Роззаман Р.

Предыстория: Сперматогенез — это процесс, при котором пролиферация и дифференциация сперматогониальных стволовых клеток (SSC) в гаплоидные сперматозоиды в яичках. У пациентов с азооспермией нарушен сперматогенез, при котором у них возникают трудности с получением нормальной спермы. Целью данного исследования является пролиферация и дифференциация SSC-подобных клеток в культуре in vitro из образцов пациентов с азооспермией и определение характера задействованных экспрессий генов. Методы и результаты: Биопсия яичек, полученная от пациентов с обструктивной азооспермией (OA) и необструктивной азооспермией (NOA), была диссоциирована и культивирована в различных средах для человеческих эмбриональных стволовых клеток (HESC) с добавлением специфических факторов роста и репродуктивных гормонов в соответствии с днем ​​культивирования с использованием 24-луночных планшетов. Колонии SSC-подобных клеток образовались через 5 недель культивирования. Анализы экспрессии генов проводились на 49-й и 90-й день с использованием количественной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (q-RT PCR). OCT4 был обнаружен у пациента с NOA, а ITGB1 был обнаружен у пациента с OA в течение 49 дней культивирования. Экспрессия генов для всех стадий сперматогенных клеток на 90-й день в основном была обнаружена у пациента с OA; ITGB1, SCP3, H2B и TNP1. Однако ген TNP1 был экспрессирован только у пациента с NOA, показавшего стадию формирования сперматид. Выводы: Наш результат показал, что существует потенциал для разработки культуры спермы in vitro из биопсии яичек пациентов с азооспермией для дальнейшего клинического применения.