Журнал гликомики и липидомики
Открытый доступ

Абстрактный

Технология визуализации сложных липидных молекулярных видов с помощью комбинации ТСХ-блоттинга и MALDI-TOF - Специальный референт по молекулярным видам ганглиозидов человеческого мозга

Таня Вальдес-Гонсалес, Наоко Гото-Иноуэ, Такахиро Хаясака, Хиронобу Исияма, Мицутоси Сето и Такао Таки

Гликосфинголипиды и фосфолипиды из белого вещества гиппокампа человека были проанализированы с помощью последовательной процедуры двумерной ТСХ (2d-ТСХ), переноса разделенных липидов на мембрану PVDF с помощью оборудования TLC-Blot и анализа масс-спектрометрии (МС) с использованием оборудования MALDI-TOF типа ионной ловушки. Метод прост и быстр; очень небольшого количества образца (0,1 мг мозговой ткани) достаточно для анализа всех липидных компонентов. 2d-ТСХ обеспечила превосходное разделение, а анализы МС позволили идентифицировать характерный профиль молекулярных видов для отдельных гликолипидов и фосфолипидов. Результаты анализов МС на ганглиозидах показали, что ди- и трисиалоганглиозиды богаче d20:1 сфингозинсодержащим церамидом, чем моносиалоганглиозиды, что предполагает наличие отбора сиалилирования после ганглиозидов GM1. Затем мы проанализировали молекулярные виды ганглиозидов, полученные из разных областей мозга с помощью технологии визуализации MS. Изображения MS отдельных ганглиозидов дали четкие визуальные профили с точки зрения распределения молекулярных видов. Профили визуализации зависели от области и также указывали на то, что сиалилтрансфераза по отношению к ганглиозиду GM1 предпочитает выбирать молекулу, содержащую сфингозин d20:1. Эта технология обеспечивает визуальную характеристику отдельных молекулярных видов фосфолипидов и гликосфинголипидов и информирует нас о метаболической характеристике целевой ткани, открывая новые ворота для красочных исследований липидомики.