ISSN: 2165-7092
Чару Батав*, Рагини Готалвал
Предыстория: Культура суспензии отдельных клеток является основным требованием для исследований клеточных культур, как и в клинической медицине. Для дезагрегации клеток использование фермента: трипсин был первым выбором исследователей. В коммерческих целях трипсин получают из коровьего источника, что увеличивает стоимость эксперимента. Настоящее исследование освещает использование трипсина, полученного из рыбных отходов, в качестве агента для диссоциации клеток, что, как ожидается, снизит воздействие на окружающую среду.
Методы: Таким образом, текущее исследование направлено на изучение эффективности трипсина, полученного из рыбных отходов, по сравнению с коммерческим аналогом в качестве агента, диссоциирующего клетки. Фермент, выделенный из внутренних отходов Catla catla, был очищен с помощью гель-фильтрационной хроматографии и охарактеризован с помощью пептидного анализа BLAST-анализа. Эффективность с точки зрения жизнеспособности клеток была проверена на раковых клеточных линиях, закупленных в NCCS, Пуна, Индия.
Результаты: Неочищенный ферментный экстракт, выделенный из отходов внутренних органов Catla catla, показал содержание белка 145,22 мг.мл -1 , которое было увеличено до 152,93 мг.мл -1 после очистки. При проведении анализа пептидов BLAST было обнаружено, что ферментом является трипсин. Фермент (концентрация 0,1% и 1%) сохранил 90% жизнеспособности клеток через 10 секунд по сравнению с коровьим источником.
Заключение: Внутренние отходы рыб рассматриваются как новый источник фермента трипсина, который продемонстрировал стойкую способность к диссоциации клеток.