Журнал наномедицинских и биотерапевтических открытий
Открытый доступ

Абстрактный

Активируемые светом липосомы для улучшения эндо/лизосомального выхода и подавления генов в клетках PC12

Вэй Дэн

Липосомы являются эффективной системой доставки генов/лекарств, широко используемой в биомедицинских приложениях, включая генную терапию и химиотерапию. Здесь мы разработали фоточувствительную липосому (lipVP), загруженную фотосенсибилизатором вертепорфином (VP). Этот фотосенсибилизатор клинически одобрен для фотодинамической терапии (PDT). LipVP использовался в качестве носителя ДНК для подавления гена рецептора 1 полипептида, активирующего аденилатциклазу гипофиза (PACAP) (PAC1R) в клетках PC12. Это было сделано путем включения антисмысловых олигонуклеотидов PAC1R внутрь полости lipVP. Клетки, которые приняли lipVP, подвергались воздействию света от источника УФ-излучения. В результате этого воздействия из VP генерировались активные формы кислорода (ROS), дестабилизирующие эндо/лизосомальные мембраны и усиливающие липосомальное высвобождение антисмысловой ДНК в цитоплазму. Эндо/лизосомальный выход ДНК был задокументирован в различные временные точки на основе количественного анализа колокализации между флуоресцентно меченой ДНК и эндо/лизосомами. Было обнаружено, что высвобожденные антисмысловые олигонуклеотиды подавляют мРНК PAC1R. Эффективность этого фотоиндуцированного подавления гена была продемонстрирована снижением интенсивности флуоресценции PAC1R на 74±5%. После светоиндуцированного переноса ДНК в клетки наблюдалась дифференциация клеток с воздействием двух видов пептидов PACAP для определения фенотипических изменений клеток после нокдауна гена PAC1R.