Журнал гликомики и липидомики
Открытый доступ

Абстрактный

Метаболическое профилирование и количественная оценка сфинголипидов методом жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии

Уцзюань Чжан, Брайан Куинн, Соня Барнс, Грегори А. Грабовски, Ин Сан и Кеннет Сетчелл

Точный, надежный и специфичный метод жидкостной хроматографии-электроспрейной тандемной масс-спектрометрии (LC-ESI-MS/MS) был разработан для профилирования и количественного определения глюкозилсфингозина (GS), глюкозилцерамида (GC), церамида (Cer), лактозилцерамида (LacCer) и сульфатидных видов липидов в различных тканях мышей. Диапазоны линейного отклика этих видов составляли 0,05-25 нг. Основными видами GC, идентифицированными во внутренних тканях мышей, были GC с N-ацильными цепями длиной C24-1, C24, C22, C16, но качественные и количественные профили различались в разных тканях. Уровни GC в селезенке были примерно в 3-5 раз выше, чем в печени и легких. Мозг отличался от внутренних тканей тем, что галактозилцерамиды (GalCer) были преобладающими идентифицированными видами моногексозилцерамидов. Силикагелевая колонка, используемая в режиме гидрофобной жидкостной хроматографии (HILIC), способна дифференцировать GC и GalCer. Анализ образцов мозга мышей показал, что GC составлял всего 0,3% от общего количества моногексозилцерамидов. Cer и LacCer также были профилированы и количественно определены в мозге, легких, печени и селезенке мышей. Применение этих методов значительно облегчило ряд целевых сфинголипидомических исследований и позволит лучше понять функцию и механизм этих разнообразных молекулярных видов в различных моделях заболеваний животных, включая болезнь Гоше.