Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

N-концевой фрагмент (PARP)-1 снижает экспрессию и активность эндогенного PARP-1 и повышает чувствительность клеток к окислительному стрессу

Ида Рэйчел Раджиах

Поли (АДФ-рибоза) полимераза-1 (PARP-1) — это ядерный фермент, играющий важную роль в восстановлении ДНК. Это делает его привлекательной мишенью для противораковой терапии. Он активируется разрывами ДНК и катализирует синтез гомополимеров АДФ-рибозы из НАД+. Конкурентные ингибиторы, а также некаталитический, связывающий ДНК домен PARP-1 отменяют его функцию синтеза полимера. Такие ингибиторы PARP-1 использовались в клинических испытаниях и, как известно, вызывают тошноту, усталость и гематологические события, а при хроническом использовании — риск повреждения ДНК, вызванного лекарственными средствами, и опухолегенеза. В этом исследовании я исследовал влияние фрагмента PARP-1-N-конца на эндогенную активность и экспрессию PARP-1 в клетках млекопитающих. Для того чтобы вызвать реакцию на повреждение ДНК, использовались различные концентрации H2O2. Для визуализации эффектов с помощью живой визуализации фрагмент PARP-1-N-терминал длиной 750 п.н. был помечен в векторе EGFPN1. Мои данные показывают обратную корреляцию между экспрессией этого фрагмента и синтезом поли (АДФ-рибозы) при более низких концентрациях H2O2 и индукцией апоптоза при более высоких концентрациях. Мои экспериментальные данные также подтверждают регуляцию эндогенной экспрессии PARP-1 фрагментом при отсутствии повреждения ДНК. Эта конструкция позволила визуализировать его функциональную способность сенсибилизировать клетки к окислительному повреждению и вызывать апоптоз, что наблюдается по образованию апоптотических предшественников и продуктов расщепления каспазы в живых клетках. Данные также предоставляют прямые доказательства его терапевтического потенциала в химиотерапии или радиотерапии для предотвращения воспалительной реакции, вызванной некрозом.