Журнал гликомики и липидомики
Открытый доступ

Абстрактный

Сравнительное гликановое профилирование с таргетингом на подокаликсин выявило разницу между эмбриональными стволовыми клетками человека и клетками эмбриональной карциномы

Ёко Итакура, Ацуши Куно, Масаси Тойода, Акихиро Умедзава и Дзюн Хирабаяси

Предыстория: Человеческие эмбриональные стволовые клетки (hESC) и человеческие эмбриональные карциномные клетки (hECC) широко использовались для исследований стволовых клеток. Хотя известно, что эти клетки имеют много общих свойств, включая высокую способность к развитию и антигены клеточной поверхности, их происхождение в основном различно: hECS происходят из внутренней клеточной массы бластоцист, тогда как hECC происходят из злокачественных опухолей. Таким образом, отсутствие хорошего метода дифференциации этих плюрипотентных клеток остается критической проблемой для диагностики опухолеобразующего потенциала плюрипотентных стволовых клеток для их медицинского применения. В этом контексте разработка специфических маркеров для различения hESC и hECC также имеет клиническое значение.

Метод: В этом исследовании мы сосредоточили наш анализ гликанов на богатом углеводами гликопротеине, подокаликсине, известном как носитель антигенов TRA-1-60 и TRA-1-81, которые представляют собой маркеры гликанов эмбриональных стволовых клеток человека. Целевой гликопротеин, полуколичественно определенный иммуноблоттингом, был обогащен из клеточных экстрактов с помощью иммунопреципитации, а различия в гликозилировании, происходящие между эмбриональными стволовыми клетками человека и клетками эндотелия человека, были систематически проанализированы с помощью передовой технологии лектинового микрочипа, лектинового профилирования с наложением антител (ALP). Также были проанализированы профили эмбриональных телец человека (hEB), дифференцированных от эмбриональных стволовых клеток человека.

Результаты и заключение: Гликановый профиль подокаликсина из hECC значительно отличался от профиля hESC. Лектиновые сигналы, соответствующие α2-6 связанной сиаловой кислоте, были повышены в hECC, а гликозидазное переваривание дополнительно выявило значительную разницу в невосстанавливающих терминальных и предпоследних структурах. Эти результаты показывают, что настоящая процедура с фокусом на конкретном гликопротеине может усилить относительно небольшие, но значимые различия между близкородственными клетками, такими как hESC и hECC, на уровне гликома. Настоящее открытие будет полезно для разработки диагностического метода для различения недифференцированных стволовых клеток от дифференцированных, используемых для регенеративной терапии.