Иммунные исследования
Открытый доступ

Абстрактный

Положительно-отрицательная обратная связь между сигналами Mir-197 и IL-17A в кератиноцитах человека

Эйнат Эльхаррар, Моамен Масалха, Галя Лерман, Рая Лейбовиц-Амит, Риад Кассем, Моти Харац, Йечезкель Сиди и Дрор Авни

Псориаз — хроническое воспалительное заболевание кожи, которое возникает в результате патологического взаимодействия активированных иммуноцитов и кератиноцитов. Недавние исследования выявили роль IL-17 и IL-22, секретируемых Th17 и Th22, в образовании и распространении псориатических бляшек. Ранее мы и другие показали, что экспрессия miR-197 значительно снижена в псориатических поражениях. Мы также показали, что miR-197 нацелена на IL-22RA1 и что эктопическая экспрессия miR-197 предотвращает индуцированную IL-22 пролиферацию и миграцию кератиноцитов.

Поскольку 3'UTR субъединицы мРНК IL17RA содержит предполагаемый сайт связывания для miR-197, нашей целью было расширить наше понимание опосредованного miRNA перекрестного взаимодействия между иммуноцитами и кератиноцитами путем изучения влияния экспрессии miR-197 на сигнальный путь IL-17A. Анализы репортера люциферазы вместе с анализом вестерн-блоттинга показали, что miR-197 напрямую нацелен на 3'UTR IL17RA. Более того, эктопическая экспрессия miR-197 привела к значительному снижению экспрессии CCL20, индуцированной IL-17A, известного нисходящего эффектора IL-17A. Интересно, что добавление IL-17A к кератиноцитам привело к быстрому и кратковременному увеличению экспрессии miR-197. Анализы иммунопреципитации хроматина показали, что обработка кератиноцитов IL-17 приводит к связыванию C/EBP с промоторной областью miR-197, и что уровень экспрессии miR-197 прямо пропорционален степени связывания C/EBP с промотором. Более того, после обработки IL-17A паттерн ацетилирования гистонов в промоторе miR-197 становится характерным для транскрибированного хроматина.

В совокупности наши результаты показывают, что между IL-17A и miR-197 в кератиноцитах существует положительно-отрицательная обратная связь; цитокин индуцирует связывание C/EBPα с последовательностями промотора miR-197, усиливает экспрессию miR-197, что отрицательно ослабляет рецептор IL-17 и снижает входной сигнал по пути IL-17A. Наша работа показывает, что при псориазе сниженная экспрессия miR-197 может предотвратить вызванное miR-197 ослабление каскада IL-17, что приводит к его повышенной активности.