Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Приготовление универсальных конъюгатов бактериальных белков, меченных пероксидазой, и разделительные свойства

Анхель Альберто Хустис-Вайллант

Целью данного исследования было получение химерных бактериальных белковых конъюгатов, их разделение с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и изучение их реактивности с сывороточными иммуноглобулинами человека с помощью иммуноблоттинга. Универсальные конъюгаты: белок LA-пероксидаза (SpLA-HRP), белок LG-пероксидаза (SpLG-HRP), белок AG-пероксидаза (SpAG-HRP), белок LAG-пероксидаза (SpLAG-HRP) и другие были приготовлены методом периодата. Конъюгаты были полимерными с высокой молекулярной массой (ММ) в диапазоне от 80-90 кДа до более 220 кДа. Все конъюгаты имеют одинаковое количество белковых полос. Однако SpLALG-HRP и SpLAG анти-IgY-HRP были менее полимерными. Анализ иммуноблоттинга показал, что все конъюгаты реагировали с сывороточными иммуноглобулинами человека. Эти конъюгаты потенциально могут использоваться в эпидемиологических исследованиях зоонозных инфекций, поражающих виды птиц и млекопитающих. Метод периодата оказался эффективным для получения химерных конъюгатов иммуноглобулинсвязывающих белков, меченных пероксидазой, а анализ иммуноблоттинга показал, что они функциональны и эффективны в реакции с иммуноглобулинами сыворотки человека.