Журнал клинической и экспериментальной офтальмологии
Открытый доступ

Абстрактный

Изменения экспрессии PEDF и PEDF-R, вызванные давлением: значение для нейропротекторной сигнализации при глаукоме

Шон Дж. Ли, Д'Энн С. Дункан, Франклин Д. Эчеваррия, Уильям М. Маклафлин, Джереми Б. Хэтчер и Ребекка М. Сэппингтон

Введение: Изменения в нейрон-глиальной сигнализации связаны с глаукомой, нейродегенеративным заболеванием, характеризующимся гибелью ганглиозных клеток сетчатки (RGC). Фактор, полученный из пигментного эпителия (PEDF), представляет собой секретируемый белок с потенциальными нейропротекторными свойствами при заболеваниях сетчатки, включая хроническую глазную гипертензию. Здесь мы стремились определить, изменяют ли умеренные краткосрочные повышения ВГД сигнализацию PEDF и влияет ли сигнализация PEDF, вызванная давлением, непосредственно на апоптоз RGC. Методы: В сетчатке наивных мышей и мышей с односторонней глаукомой, вызванной микрочастицами, мы исследовали экспрессию и локализацию PEDF и его рецептора (PEDF-R), специфичную для определенного типа клеток, с помощью количественной ПЦР и иммуногистохимии. Используя первичные культуры очищенных RGC и клеток Мюллера, мы исследовали экспрессию PEDF, специфичную для определенного типа клеток, в ответ на 48 часов повышенного гидростатического давления, с помощью мультиплексного ИФА и иммуноцитохимии. Мы также измерили апоптоз ГКС, вызванный давлением, в присутствии или в отсутствие атглистатина, мощного и селективного ингибитора PEDF-R, и рекомбинантного PEDF, используя анализы TUNEL. Результаты: PEDF и PEDF-R конститутивно экспрессируются в наивной сетчатке, в первую очередь в слоях ганглиозных клеток и нервных волокон. Повышенное ВГД увеличивает экспрессию PEDF и PEDF-R, особенно связанную с ГКС и клетками Мюллера. Повышенное давление in vitro увеличило секрецию PEDF в 6 раз в ГКС и имело тенденцию к увеличению экспрессии клетками Мюллера по сравнению с давлением окружающей среды. Это сопровождалось изменениями в субклеточной локализации PEDF-R в обоих типах клеток. Ингибирование сигнализации PEDF атглистатином увеличивало апоптоз, вызванный давлением, в ГКС, а обработка рекомбинантным PEDF ингибировала апоптоз, вызванный давлением, оба случая в зависимости от дозы. Заключение: Наши результаты показывают, что умеренные краткосрочные повышения ВГД способствуют передаче сигналов PEDF посредством повышения регуляции как PEDF, так и PEDF-R. На основании исследований in vivo и in vitro эта передача сигналов PEDF, вероятно, исходит как от клеток Мюллера, так и от ГКС и имеет потенциал для прямого ингибирования апоптоза ГКС.