Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Роль различных участков α-синуклеина во взаимодействии с жирной кислотой мозга DHA

Джорджия Де Франчески и Патриция Полверино де Лаурето

α-Синуклеин — это белок, участвующий в болезни Паркинсона. Его взаимодействие с полиненасыщенными жирными кислотами мозга привлекает большой интерес. Ранее мы исследовали взаимодействие α-синуклеина с докозагексаеновой кислотой (ДГК), и было обнаружено взаимное влияние между мономерным белком и жирной кислотой. α-Синуклеин приобретает α-спиральную вторичную структуру с быстрым равновесием между его свободной и связанной с липидом формой. В α-спиральной форме сегмент белка 73-102 является гибким и не характеризуется постоянной структурой. ДГК образует масляные капли в присутствии белка. Для исследования на молекулярном уровне участия различных областей белка во взаимодействии с ДГК были подготовлены укороченные виды белка (syn1-99, syn1-52, syn57-102 и syn108-140), и их способность взаимодействовать с ДГК была проанализирована с помощью кругового дихроизма и протеолитического картирования. Данные CD показали, что все пептиды, за исключением соответствующего C-концевому региону, способны приобретать альфа-спиральную структуру в присутствии DHA. Различное молярное соотношение полипептид/DHA, необходимое для достижения максимального сворачивания, и различное конечное содержание спирали между двумя N-концевыми пептидами (syn1-99, syn1-52) и пептидом NAC (syn57-102) предполагают, что повторы последовательности играют важную роль в переходе α-спирали и, таким образом, во взаимодействии с DHA. Эксперименты по протеолизу показали, что все укороченные виды устойчивы к протеолизу в присутствии насыщающих концентраций DHA, что указывает на то, что почти все остатки вовлечены во взаимодействие с липидом. C-концевой регион, в отличие от других, по-видимому, модулирует только часть молекулы, зарытую в липидный отсек. Кроме того, была также проанализирована способность пептидов влиять на самосборку жирной кислоты, что показало, что взаимодействующие пептиды также изменяют физическое состояние ДГК за счет положительно заряженного N-конца.