Журнал клеточной науки и терапии
Открытый доступ

Абстрактный

Методика безопасности генной терапии тяжелого комбинированного иммунодефицита, сцепленного с Х-хромосомой

Nicole Scheumann, Elisa Kieback and Wolfgang Uckert

Тяжелый комбинированный иммунодефицит, сцепленный с Х-хромосомой (SCID-X1), вызванный дефектом общей гамма-цепи рецептора цитокина (γc), успешно лечился генной терапией в клинике. Однако возникновение лейкемии у нескольких пациентов, которому предшествовала потеря олигоклональности, показало, что лечение связано с риском, присущим генетической модификации гемопоэтических стволовых клеток. В этом исследовании мы разработали безопасный подход, который позволяет специфично устранять генно-модифицированные клетки. Для этого в мышиный γc-белок была введена небольшая пептидная последовательность (myc-tag). Клетки, экспрессирующие модифицированную цепь, могут быть обнаружены с помощью myc-специфического антитела с помощью проточной цитометрии и эффективно истощаются in vitro в присутствии факторов комплемента. Кроме того, Т-клетки, полученные из тимуса от мышей, восстановленных с помощью myc-меченых γc-трансдуцированных стволовых клеток костного мозга, могут быть истощаться путем введения антител in vivo. Аналогично, специфический комплемент-опосредованный лизис наблюдался для человеческих Т-клеток, экспрессирующих человеческий myc-меченый γc. В анализе пролиферации клеток модифицированная цепь рецептора цитокина не показала функциональных нарушений по сравнению с цепью дикого типа. Подводя итог, мы показываем доказательство принципа безопасности механизма генной терапии SCID-X1, который позволил бы устранить генно-скорректированные клетки у пациента при наблюдении за моноклональным ростом.