Журнал хроматографии и методов разделения
Открытый доступ

Абстрактный

Разделение и анализ моно-, ди- и трифосфатных нуклеотидов из клеточного экстракта с использованием обращенно-фазовой ВЭЖХ

Правин Кусуманчи, Рэйчел Роджерс, Тин Чжан, Сутхат Лиангпунсакул, Чжихун Ян, Хиремагалур Н Джаярам

Целью настоящего исследования было разработать простую, надежную и высокочувствительную ионно-парную обращенно-фазовую высокоэффективную жидкостную хроматографию для разделения и количественного определения пуриновых, пиримидиновых и пиридиновых нуклеотидов. Во-первых, мы оптимизировали условия колонки для достижения базового разделения и количественного определения 15 нуклеотидов. Наименьшее количество, необходимое для обнаружения всех рибонуклеотидов с воспроизводимостью и высокой точностью, составило 10 пмоль. Калибровочные кривые для всех стандартов нуклеотидов были линейными в диапазоне 10-200 пмоль. Этот метод можно успешно использовать для одновременного количественного определения всех нуклеотидов в исследованиях с ингибиторами нуклеотидов, такими как тиазофурин и бензамидрибозид в линиях раковых клеток. Это первый отчет, показывающий разделение всех 15 нуклеотидов за одну инъекцию.