Журнал клинической и клеточной иммунологии
Открытый доступ

Абстрактный

Перекрестная проба на основе твердой фазы с использованием платформы Luminex для аллотрансплантации твердых органов: скорее регресс, чем прогресс по сравнению с процедурой прекурсоров на основе ИФА

Даниэла Бау, Гэри Соерс, Аня Вале, Вольфганг Альтерманн и Джеральд Шлаф

Антитела, направленные против антигенов HLA данного донора, представляют собой наиболее значимую причину сверхострого и острого отторжения. Для того чтобы выбрать реципиентов без специфических для донора антител, впервые была установлена ​​перекрестная совместимость с комплементзависимой цитотоксичностью (CDC-), которая до сих пор является стандартной процедурой. Ее отрицательный предтрансплантационный результат в настоящее время рассматривается как наиболее важное требование для успешного краткосрочного выживания почечного трансплантата. Однако как функциональный анализ он сильно зависит от доступности изолированных донорских лимфоцитов и, в частности, от их жизнеспособности. Более того, в течение последних десяти лет все чаще обсуждаются некоторые недостатки процедуры, основанной на CDC, в связи с высокой восприимчивостью этого анализа к разрушительным факторам, которые часто приводят к ложноположительным результатам. В этом контексте было показано, что несколько аутоиммунных заболеваний, особенно типа иммунного комплекса (тип III) или фармакологическое лечение данного реципиента приводят к неожиданным «ложноположительным» результатам перекрестной совместимости CDC. В качестве методических альтернатив для специфического перекрестного сопоставления антител к HLA в нашей лаборатории типирования тканей и в некоторых других группах были созданы две процедуры на основе ИФА: i) система мониторинга антител (AMS-) ELISA и ii) AbCross-ELISA. Однако обе системы были прекращены по чисто коммерческим причинам в 2013 и 2016 годах соответственно. Используя тот же набор диагностических антител, AMS-ELISA, теперь называемый Donor-Specific Antibodies/DSA, впоследствии был снова изготовлен в виде матрицы на основе микрошариков с использованием платформы Luminex. С целью установления анализа DSA в качестве единственной оставшейся системы перекрестного сопоставления на основе твердой фазы, доступной на рынке, эта процедура была систематически оценена в нашей лаборатории. Однако, в первую очередь, но не исключительно, из-за недостатков программного обеспечения для оценки, 69 (32,5%) из виртуально определенных результатов перекрестной совместимости (n=212 независимых спецификаций анти-HLA класса I и II и соответствующих им DSA-анализов соответственно) были классифицированы как расходящиеся с использованием DSA-анализа, тогда как только 143 результата (67,5%) были классифицированы как соответствующие программным обеспечением этого анализа. Что касается выбранной когорты реципиентов (n=106), не менее 62 (58,4%) из них характеризуются результатами, которые не подтверждаются виртуальным перекрестным соответствием. Здесь мы приводим доказательства того, что по разным причинам результаты, предоставляемые DSA-анализом, в отличие от результатов AMS-ELISA как его предшественника, должны быть критически оспорены. Поэтому мы приходим к выводу, что производителю необходимо срочно внести изменения, чтобы снова привести к системе достаточной достоверности, пригодной для рутинной диагностики любой лаборатории.