Журнал клинической и клеточной иммунологии
Открытый доступ

Абстрактный

Динамическая активация Т-клеток и функциональный анализ в микрочипе нанолитровых капель

Сахели Саркар, Винни Мотвани, Пуджа Сабхачандани, Ноа Коэн и Таня Конри

Цель: Характеристика гетерогенности иммунных импульсов, направленная на повышение активности отдельных клеток, а также взаимодействий между различными подгруппами иммунных клеток. Соблюдение и активация эффекторных регуляторов клеток является зависимой от контактной и опосредованной клетки растворимым способом обеспечения паракринной сигнализации. В настоящее время существует несколько методов, которые позволяют управлять связующими процессами одновременно без включения ограничений неадгезивных клеток и блокировать перекрестные помехи с сохранением парных клеток. Здесь мы описываем микрочиповую платформу микрожидкостных капель, которая позволяет проводить быстрый функциональный анализ последовательностей отдельных клеток и коинкапсуляции гетеротипических парклеток, что является основным обеспечением, позволяющим оценить динамическое состояние активации первичных Т-клеток.
Методы: Микрожидкостная платформа-капелька измеряет стыковать и стыковать монодисперсные капли нанолитра (0,523 нл) с использованием тысяч капель для эксперимента. Отдельные электрические Т-клетки инкапсулировались в капли и стимулировались на чипе кальциевым ионофором иономицином. Т-клетки также были коинкапсулированы дендритными клетками, активированными пептидом овальбумином, с образованием динамиков диптихи кальциевого сигнала.
Результаты: стимулированные иономицином проявления флуктуации в кальциевой передаче по сравнению с контролем клетки. Обе наблюдаемые клетки продемонстрировали выраженную гетерогенность в ответах. Кальциевая сигнализация наблюдалась в Т-клетках сразу после контакта с ДК, что предполагает активацию раннего сигнала. Т-клетки также продолжают неконтактно-опосредованное повышение уровня изменений, этот ответ был отсроченным, хотя и по сравнению с контактно-опосредованными сигналами.
Выводы: Наши результаты показывают, что эта микрофлюидная платформа на основе массива нанолитровых капель является многообещающим методом для измерения гетерогенности в различных типах клеточных структур, обнаружения мгновенных/отсроченных событий активации и живого клеточного фенотипирования иммунных клеток.