ISSN: 2329-6917
Зули Ян, Яджуань Чжэн, Фань Ху, Чжан Чжан, Фукунь Чжао и Шифу Чжан
Одной из характеристик терминальной дифференцировки эритроидных клеток является экспрессия гемоглобина и энуклеация. В настоящем исследовании с использованием культивируемых в реальном времени клеток, индуцирующих анемию вируса Френда (FVA), сканирующей электронной микроскопии (SEM), иммунофлуоресценции в сочетании с лазерной сканирующей конфокальной микроскопией (LSCM), клетки FVA, индуцированные эритропоэтином (EPO), использовались для: 1) изучения формы и пропорции клеток на разных стадиях дифференцировки, процесса энуклеации, образования кровяных островков и поглощения ядер макрофагами в реальном времени, 2) количественного анализа маркеров поверхности эритроидных клеток, включая CD71 и Ter119, а также белков, ассоциированных с цитоскелетом (статмин, септин8 и RBBP4). Результаты мониторинга энуклеации в реальном времени показали, что для выдавливания ядер из кариопикноза (полихроматических эритробластов) потребовалось около 7–8 часов. Кроме того, было показано, что макрофаги поглощали вытесненные эритроидные ядра. СЭМ показала разнообразие форм зарождающихся ретикулоцитов. В процессе эритроидной дифференцировки экспрессия обоих трансферных рецепторов CD71 и Ter119 была выше, чем у взрослых клеток крови, тогда как цитоскелетно-ассоциированные белки (статмин, септин8 и RBBP4) постепенно снижались. Поэтому систематическое наблюдение за процессом дифференцировки и энуклеации обеспечит более глубокое понимание клеточных и молекулярных механизмов эритроидной дифференцировки и канцерогенеза.