Передовые методы в биологии и медицине
Открытый доступ

Абстрактный

Модель данио-рерио для изучения роли микроРНК в функционировании и заболеваниях клубочков

Янина Мюллер-Дейле* и Марио Шиффер

МикроРНК (miR) — это некодирующие малые РНК, которые играют важную роль в посттранскрипционной регуляции экспрессии генов. Недавние исследования показывают, что miR также являются медиаторами в различных патологических процессах. Здесь мы рассмотрим, как модель данио-рерио может быть использована для изучения роли miR в функции и заболевании клубочков. Микроинъекции имитаторов miR были сделаны в икринки и личинки данио-рерио. Трансгенная линия данио-рерио, которая экспрессирует зеленый флуоресцентный плазменный белок, была использована для исследования потери белка через барьер клубочковой фильтрации. Анализ с помощью электронной микроскопии выявил уровень и степень повреждения клубочков после сверхэкспрессии miR. MiR-143-3p, по-видимому, важен для гломерулярного гликокаликса, поскольку сверхэкспрессия miR-143-3p приводит к снижению регуляции версикана, протеинурии и повреждению на эндотелиальной и эпителиальной стороне барьера клубочковой фильтрации. Напротив, сверхэкспрессия miR-378a-3p при инъекции специфического имитатора miR вызывала протеинурию, отек, сглаживание подоцитов и утолщение базальной мембраны клубочков. Эти результаты можно было бы исправить с помощью коинъекций конструкции нефронектина с мутировавшей областью 3'UTR, с которой miR не могла связываться. Таким образом, имитаторы miR можно использовать в модели данио-рерио для изучения роли miR, вовлеченных в гломерулярные заболевания.