Журнал клинической и клеточной иммунологии
Открытый доступ

Абстрактный

Трансформирующий фактор роста- β 1 противодействует сигналу интерлейкина-5, способствующему выживанию, активируя кальпаин-1 в первичных эозинофилах человека

Цифа Се, Чжун-Цзянь Шен, Джиён О, Хайян Чу и Джеймс С. Малтер

Предыстория: Эозинофилы быстро подвергаются апоптозу, если не подвергаются воздействию способствующих выживанию цитокинов, таких как интерлейкин 5 (ИЛ-5) или фактор стимуляции колоний гранулоцитов-макрофагов (ГМ-КСФ). In vivo эозинофилы подвергаются воздействию TGF-β 1, который может вызывать апоптоз, что позволяет предположить, что он может функционировать для противодействия эффектам ИЛ-5 или ГМ-КСФ и ограничивать эозинофилию тканей in vivo.
Цель: Целью данного исследования было изучение проапоптотического эффекта TGF-β отдельно и в сочетании с ИЛ-5 на эозинофилы.
Методы: Жизнеспособность эозинофилов периферической крови (ПБЭ) оценивали с помощью проточной цитометрии после воздействия TGF-β1 и ИЛ-5. Активация кальпаина-1 определялась в клеточных экстрактах с помощью вестерн-блоттинга эндогенных субстратов и с флуорогенным субстратом α-спектрина. Молекулярные взаимодействия между кальпаином 1 и кальпастатином оценивались с помощью иммунопреципитации и вестерн-блоттинга.
Результаты: физиологические концентрации TGF-β1 значительно антагонизировали способствующие выживанию эффекты IL-5. Апоптоз, вызванный TGF-β1, подавлялся ингибиторами кальпаина или его нисходящей мишени, каспазы 3. Сигнализация TGF-β1 через Smad3 не была затронута IL-5 и была необходима для проапоптотических эффектов TGF-β1. Однако фосфорилирование Akt, вызванное IL-5, ингибировалось TGF-β1 и было связано с ускоренным расщеплением кальпаина и гибелью эозинофилов.
Заключение: TGF-β1 индуцирует активацию кальпаина-1 посредством антагонизма Akt, который индуцирует активацию каспазы и апоптоз эозинофилов.