Журнал клинической и клеточной иммунологии
Открытый доступ

Абстрактный

Повышение экспрессии и активности гена ангиотензинпревращающего фермента циркулирующих Т-клеток при острых коронарных синдромах

Коппо М., Бандинелли М., Поггези Л. и Бодди М.

Предыстория: Т-клетки наделены функциональной клеточной ренин-ангиотензиновой системой (RAS), связанной и независимой от циркулирующей RAS, которая может автономно синтезировать ангиотензин (Ang) II. Ангиотензинпревращающий фермент (ACE) является ключевым этапом в регуляции синтеза Ang II RAS, и сообщалось, что экспрессия гена ACE T-клеток повышается у гипертоников с воспалением низкой степени. Ang II и T-клетки играют важную роль в системном воспалении, которое возникает у пациентов с нестабильной стенокардией, но неизвестно, участвует ли RAS T-клеток напрямую.

Целью данного исследования было измерение экспрессии гена АПФ и ферментативной активности в клеточном осадке и в супернатанте культивированных циркулирующих Т-клеток человека, полученных от контрольных субъектов, пациентов с гипертонией или нестабильной стенокардией. Также были исследованы уровни С-реактивного белка (СРБ) как маркера системного воспаления.

Методы: мРНК для экспрессии гена АПФ была получена в Т-клетках, выделенных из периферической крови, и количественно определена с помощью транскриптазно-полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени; мРНК для INF-гамма была полуколичественно определена по сравнению с геном домашнего хозяйства глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (GAPDH) с помощью обратной транскриптазной (ОТ) ПЦР. Активность АПФ в клеточном осадке и в культуральной среде (супернатант) измерялась с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) синтетического субстрата. Активность ренина плазмы (PRA) и уровни Ang II измерялись с помощью радиоиммунного анализа и высокочувствительного C-реактивного белка (hsCRP) с помощью коммерческого набора.

Результаты: У пациентов с гипертонией и более выраженно у пациентов со стенокардией были измерены повышенные уровни мРНК для АПФ, повышенная клеточная ферментативная активность АПФ и уровни Ang II в культивируемых циркулирующих Т-клетках по сравнению с данными, полученными в Т-клетках из контрольной группы (p < 0,05 для всех). Добавление Ang II к осадку Т-клеток еще больше увеличило активность АПФ и синтез Ang II. У пациентов со стенокардией, которые показали самую высокую экспрессию гена АПФ и ферментативную активность и значения hsCRP, стимуляция Т-клеток Ang II вызывала почти полное высвобождение АПФ в супернатант.

Выводы: У пациентов со стенокардией с уровнями hsCRP >3 мг/дл отмечено повышение экспрессии и активности циркулирующего гена АПФ на основе Т-клеток в культуре Т-клеток, дополнительно усиленное Ang II. Согласно нашим результатам in vitro , активированные in vivo Т-клетки могут автономно увеличивать локальный синтез de novo Ang II в тканях, куда они мигрируют, и играть роль в разрыве коронарных бляшек и повреждении микрососудов при нестабильной стенокардии.