Журнал лейкемии
Открытый доступ

Абстрактный

Полезность мультиплексного анализа мутаций в диагностике хронического миеломоноцитарного лейкоза

Дафна Анг, Гуан Фань, Эли Траер, Тибор Ковачович, Ники Либорг, Марк Лорио, Андреа Уоррик, Кэрол Бидлинг, Сьюзан Олсон, Кен Гаттер, Рита М. Бразиэль, Кристофер Л. Корлесс, Ричард Пресс и Дженнифер Данлэп

Хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ) — миелоидное новообразование, характеризующееся как миелопролиферативными, так и миелодиспластическими признаками в дополнение к постоянному моноцитозу периферической крови (>1×109/л), который необходим для диагностики. Клональные цитогенетические аномалии выявляются только у 20–30 % пациентов с ХММЛ, и в некоторых случаях может быть сложно исключить реактивный моноцитоз. Недавно было установлено, что в патогенезе ХММЛ задействовано несколько генных мутаций, включающих сигнальные пути тирозинкиназы, регуляцию транскрипции, метаболизм, сплайсинг и эпигенетические регуляторные механизмы. Это исследование было разработано для оценки рецидивирующих мутаций при ХММЛ с использованием подхода, основанного на мультиплексной масс-спектрометрии, и для определения полезности скрининга мутаций при ХММЛ, особенно в цитогенетически нормальных случаях. База данных хирургической патологии Университета здравоохранения и науки Орегона (OHSU) была изучена с 2010 по 2012 год для выявления последовательных случаев CMML, соответствующих диагностическим критериям ВОЗ. Были проведены цитогенетические анализы и молекулярные исследования диагностических образцов костного мозга. Экстракты ДНК были проверены на точечные мутации с использованием мультиплексной ПЦР-панели с масс-спектроскопическим считыванием, которая охватывает 370 точечных мутаций в 31 гене, связанном с лейкемией. Из 48 случаев CMML, выявленных в файлах OHSU, 43 имели доступные цитогенетические исследования. Из них 10/43 случаев (23%) имели цитогенетические отклонения, включая: трисомию 8 (n=4), трисомию 21 (n=2), делецию 7q (n=1), делецию 13q (n=1), сложный кариотип (n=1) и t (3;3) (n=1). Из случаев с цитогенетическими данными, 22 имели доступную ДНК для анализа мутаций, и 11 из этих генотипированных случаев (50%) имели обнаруживаемые мутации в следующих генах: CBL (n=3), CKIT, JAK2, KRAS (n=2), NRAS (n=3) и NPM1. Девять случаев с обнаруженными мутациями имели нормальную цитогенетику. Сопутствующие молекулярные и цитогенетические аномалии наблюдались в 2 случаях: один случай с трисомией 8 и CBL C384Y и один случай с трисомией 21 и JAK2 V617F. В 22 случаях с доступными цитогенетическими и молекулярными данными проведение рутинного мультиплексного молекулярного тестирования в дополнение к цитогенетическим исследованиям у пациентов с CMML увеличило обнаружение генетических аномалий с 23% (5/22) до 64% ​​(14/22), с частыми мутациями CBL и RAS в нашей когорте. Это исследование подтверждает, что мутации генов являются распространенным явлением при ХММЛ, и мультиплексный анализ мутаций может применяться в клинических условиях для помощи в диагностике и может выявлять мутации, поддающиеся действию, для таргетной терапии.