Журнал лейкемии
Открытый доступ

Абстрактный

Бета-гидроксиизовалерилшиконин подавляет рост клеток множественной миеломы U266, активируя митохондриальный путь

Ихуэй Хэ, Сяоянь Чен и Линин Конг

Предыстория: Бета-гидроксиизовалерилшиконин (бета-ВИЧ) — это соединение, выделенное из традиционной восточной лекарственной травы литоспермум радикс. Этот препарат играет роль неконкурентного ингибитора АТФ протеин-тирозин киназ (PTK) и демонстрирует большой потенциал для индукции апоптоза против раковых клеток человека. Мы исследовали влияние бета-ВИЧ на клетки множественной миеломы U266 и прояснили детали основного механизма его апоптозиндуцирующей активности. Цель: Целью данной работы было проследить апоптозиндуцирующую активность бета-ВИЧ на клетки U266, а также основные механизмы. Методы: Тест набора для подсчета клеток-8 (CCK-8) и анализ образования колоний были выполнены для оценки влияния бета-ВИЧ на жизнеспособность клеток U266 и образование колоний. Анализ апоптоза проводился на основе флуоресцентного окрашивания DAPI и анализа фрагментации ДНК. ПЦР в реальном времени использовалась для оценки изменений экспрессии мРНК Bcl-2 и Bax, в то время как непрямой иммунофлуоресцентный анализ и вестерн-блоттинг использовались для подтверждения экспрессии Bcl-2, Bax, каспазы-3, каспазы-9, PARP и цитохрома c. Результаты: тест CCK-8 и анализ формирования колоний показали, что лечение бета-ВИЧ привело к значительному снижению пролиферации клеток (P < 0,05 или 0,01) и образованию колоний (P < 0,01). Результаты ПЦР в реальном времени показали, что уровень экспрессии мРНК Bcl-2 снизился через 72 ч после совместного культивирования бета-ВИЧ (P < 0,01), хотя мРНК Bax изменилась без существенного изменения. Иммунофлуоресцентный анализ показал, что каспаза-3 активировалась в группе, обработанной бета-ВИЧ, что сопровождалось повышенной экспрессией цитохрома c. Вестерн-блот также показал, что экспрессия белка Bcl-2 в группе, обработанной бета-ВИЧ, снизилась, а цитохром c увеличился через 72 часа после совместного культивирования. Более того, каспаза-3 и -9, а также PARP были активированы, все с P<0,01 по сравнению с двумя контрольными группами. Заключение: Бета-ВИЧ проявил значительную апоптоз-индуцирующую активность в клетках U266, возможно, путем ингибирования пролиферации и стимулирования апоптоза через митохондриальный путь.