Журнал гликомики и липидомики
Открытый доступ

Абстрактный

Клонирование, рекомбинантная экспрессия в Escherichia coli и ДНК-связывающие свойства Datura metel L. Фактор транскрипции Myb

Прия Арора

Белки MYB представляют собой суперсемейство факторов транскрипции, которые играют важную роль в процессах развития и защиты растений. Семейство MYB характеризуется наличием консервативного домена связывания ДНК, называемого доменом MYB, который обычно содержит две или три несовершенные повторяющиеся последовательности. В настоящем исследовании мы сообщаем о клонировании, экспрессии и свойствах связывания ДНК фактора транскрипции Myb из Datura metel L. Была обнаружена открытая рамка считывания из 856 п.н., которая может кодировать белок из 278 аминокислотных остатков. кДНК, кодирующая DmMyb, была клонирована в векторе экспрессии pRSETA и гетерологично экспрессирована в E.coli. DmMyb, экспрессируемый как гистидин-меченый слитый белок, был очищен с помощью аффинной хроматографии Ni-NTA. Кроме того, способность частично очищенного рекомбинантного белка DmMYB связывать MBCE (Myb-связывающие цис-элементы) была оценена с пятью известными Myb-специфичными цис-действующими элементами (MSCE 1, MSCE 2, MSCE 3, MSCE 4 и MSCE 5) с использованием анализа сдвига электрофоретической подвижности (EMSA). Анализ связывания показал, что частично очищенный рекомбинантный DmMyb взаимодействует с тремя Myb-специфичными цис-действующими элементами (MBCE 3, MBCE 4 и MBCE 5). Необходимы дальнейшие исследования для обеспечения глубокого понимания транскрипционной регуляции генов/генных сетей Datura metel, которая связана с фактором транскрипции DmMyb.