Передовые методы в биологии и медицине
Открытый доступ

Абстрактный

Оценка реакции специфических антител IgA, IgG и IgM против вируса классической чумы свиней (CSFV) у свиней, вакцинированных антигенами, экспрессируемыми репликонными частицами альфавируса

Мохаммад М. Хоссейн* и Рэймонд Р.Р. Роуленд

Гликопротеин E2 вируса классической чумы свиней (CSFV) был экспрессирован в системе экспрессии репликонных частиц (RP) на основе альфавируса. Разработан иммуноферментный анализ флуоресцентных микросфер (FMIA) для обнаружения антител, специфичных к E2 вируса CSFV, у свиней, вакцинированных альфавирусным RP. Полноразмерный E2 вируса CSFV (аминокислотные остатки 1-376) был фрагментирован на несколько частей, а рекомбинантные белки были экспрессированы в Escherichia coli. Очищенные белки были конъюгированы с микросферическими гранулами, целевые антигены были собраны в единый мультиплекс и протестированы против сывороток, вакцинированных антигенами, экспрессированными альфавирусом. Результаты представлены как средняя интенсивность флуоресценции (MFI), полученная из медианного значения не менее 100 микросфер, и значения MFI были преобразованы в положительное отношение на образец (S/P). Из восьми рекомбинантных белков E2, оцененных в этом исследовании, самые высокие значения MFI были получены для E2 (aa 1-181). Гликопротеин E2 вируса КЧС был экспрессирован в системе экспрессии репликона на основе альфавируса. Результаты показывают, что вакцинированные животные имели специфические для вируса КЧС IgA, IgG и IgM в сыворотке и ротовой жидкости. Значения MFI для отрицательного образца сыворотки показали 20-70-кратное снижение по сравнению с положительным образцом сыворотки. Реакция антител на антигены вируса КЧС была IgG>IgM>IgA. Результаты показали, что одновременное обнаружение антител IgG, IgM и IgA может обеспечить улучшенный диагностический инструмент.